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文檔簡介
1、目的:通過電針督脈百會、大椎從調(diào)節(jié)腦與神經(jīng)發(fā)育密切相關(guān)的神經(jīng)誘導因子Noggin基因的表達入手,在不同時相觀察電針治療時海馬Noggin mRNA表達及神經(jīng)干細胞(NSC)增殖、分化,結(jié)合學習記憶的神經(jīng)行為學觀察,探討電針通過Noggin對VD模型大鼠的海馬神經(jīng)發(fā)生影響機制及神經(jīng)誘導因子Noggin、神經(jīng)干細胞(NSC)增殖、分化對學習記憶的影響機制,為電針治療VD提供理論依據(jù)。
方法:對健康的SD雄性大鼠采用改良2-VO法造
2、成VD模型,隨機分為1W、2W、4W、6W模型及電針組,BrdU腹腔注射標記海馬分裂細胞;采用針刺督脈腧穴百會、大椎,使用韓氏電針治療儀予15Hz連續(xù)波、1mA輸出電流,治療20min;利用 Morris水迷宮觀察空間學習能力和記憶能力的變化情況;采用 RT-PCR、HE染色及BrdU免疫組織化學法及BrdU、NeuN、GFAP免疫熒光雙標染色法分別觀察 Noggin基因的表達、海馬神經(jīng)組織形態(tài)學變化及海馬齒狀回(DG)神經(jīng)發(fā)生的規(guī)律及
3、電針治療后上述指標的變化情況。
結(jié)果:(1)行為學檢測:電針組大鼠在第2、4、6周逃避潛伏期值均明顯高于模型組大鼠(P<0.05或P<0.01);電針組大鼠之間平臺象限游泳時間沒有明顯差異,但與同時相模型組相比有差異(P<0.05或P<0.01)。
(2)電針對VD模型大鼠海馬Noggin基因表達的影響:通過RT-PCR半定量檢測神經(jīng)誘導因子Noggin mRNA含量發(fā)現(xiàn)在不同時期海馬均有Noggin基因表達,在造模
4、初期較高,但隨著造模后時間的延長各組Noggin mRNA表達減少,同時相的電針組與模型組相比有差異(P<0.05或P<0.01)。
(3)海馬組織形態(tài)學變化:通過對海馬組織進行HE染色后觀察細胞形態(tài)發(fā)現(xiàn),電針組大鼠海馬齒狀回區(qū)較模型組結(jié)構(gòu)緊密,排列整齊,層次豐富,且電針組海馬神經(jīng)細胞形態(tài)較模型組好。
(4) NSC的增殖情況:電針組大鼠海馬齒狀回顆粒下層的BrdU陽性細胞多于同時相的模型組,但不管是電針組還是模型組
5、隨著缺血時間的延長BrdU陽性細胞減少(P<0.05),在第4、6周組差異更為顯著(P<0.01)。
(5) NSC分化情況:缺血2周后,海馬GCL有細胞出現(xiàn)BrdU+NeuN及BrdU+GFAP雙陽性表達,電針組分化為神經(jīng)元數(shù)量多于模型組(P<0.05),分化的膠質(zhì)細胞數(shù)量多于分化為神經(jīng)元的細胞量,但分化為膠質(zhì)細胞量模型組與電針組無顯著性差異。
結(jié)論:⑴電針能夠改善VD模型大鼠空間學習能力和記憶能力;
⑵
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