hTERT反義寡核苷酸對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖的影響及其作用機(jī)制.pdf

1、目錄英文縮寫(xiě)與索引英文縮寫(xiě)與索引………………………………………………………..1中文摘要中文摘要…………………………………………….…………………2英文摘要英文摘要…………………………………………………………..…....4引言引言………………………………………………….…………………6實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料…………………………………………...……..………...…10實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)方法………………………………………………………………12結(jié)果

2、結(jié)果………………………………………………………..……..……16討論討論………………………………………………….……..…………25結(jié)論結(jié)論…………………………………………………………..………..29參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)……………………………………………………..……..…30綜述綜述…………………………………………………………..……..…33已發(fā)表論文已發(fā)表論文…………………………………………………..….....….40致謝致謝…

3、………………………………………………………..……..…412hTERT反義寡核苷酸對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖的影響及其作用機(jī)制反義寡核苷酸對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖的影響及其作用機(jī)制研究生：彭幫國(guó)研究生：彭幫國(guó)導(dǎo)師：吳成秋師：吳成秋教授教授中文摘要目的目的:hTERT反義寡核苷酸通過(guò)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染入乳腺癌細(xì)胞，觀察其對(duì)MCF7細(xì)胞端粒酶活性、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡和癌基因bcl2的影響，探討hTERT反義寡核苷酸對(duì)MCF7細(xì)胞增值的影響及其影響機(jī)制，為乳腺癌的基

4、因治療提供理論依據(jù)。方法方法:本實(shí)驗(yàn)以體外培養(yǎng)的人乳腺癌細(xì)胞株MCF7為研究對(duì)象，觀察hTERT反義寡核苷酸對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖的影響；利用脂質(zhì)體介導(dǎo)hTERT反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染MCF7細(xì)胞，采用多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)酶聯(lián)免疫測(cè)定法（PCRELISA）檢測(cè)乳腺癌細(xì)胞端粒酶活性；通過(guò)MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性；以流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡；用免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)Bcl2蛋白的表達(dá)，用平板集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞集落的形成。結(jié)果結(jié)果:1.MTT法檢測(cè)結(jié)果

5、顯示：ASDON不同濃度組間細(xì)胞增殖抑制率差異有顯著性(P﹤0.01)，且隨濃度的增加，其抑制作用增強(qiáng)；并且ASDON作用不同時(shí)間對(duì)細(xì)胞增殖抑制率不同，72h組的抑制率高于48h和24h組的抑制率(P﹤0.01)，而對(duì)照組、正義寡核苷酸組、脂質(zhì)體組對(duì)細(xì)胞的增殖無(wú)抑制作用。2.平板集落形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，反義寡核苷酸可使細(xì)胞集落形成率降低，抑制率為66.6%，高于正義寡核苷酸、脂質(zhì)體組、對(duì)照組的抑制率(P﹤0.01)，表明ASODN對(duì)MCF