創(chuàng)傷早期患者血漿中氣體信號(hào)分子表達(dá)分析.pdf

1、目的:近年來，隨著人類社會(huì)活動(dòng)空間機(jī)械化程度的提高，嚴(yán)重的、多部位、多臟器創(chuàng)傷發(fā)生率日趨增高。除了創(chuàng)傷引起患者直接損傷外，炎癥介質(zhì)“二次打擊”對(duì)機(jī)體組織器官也造成的嚴(yán)重的傷害，所以如何預(yù)防、控制炎癥介質(zhì)失控狀態(tài)對(duì)機(jī)體造成的二次傷害，從而阻斷SIRS(systemicinflammatory response syndrome)向更嚴(yán)重的MODS（multiple organdysfunction syndrome）發(fā)展具有重要意義。內(nèi)源

2、性一氧化氮(nitricoxide，NO)、一氧化碳(carbon monoxide，CO)、硫化氫(hydrogen sulfide，H2S)三種氣體信號(hào)分子已被證實(shí)存在于人體的炎癥反應(yīng)過程，但對(duì)于不同疾病，不同時(shí)期的影響如何仍值得進(jìn)一步探討研究認(rèn)識(shí)，本實(shí)驗(yàn)將檢測在嚴(yán)重創(chuàng)傷初期，不同程度創(chuàng)傷患者的血漿中三種氣體分子表達(dá)情況，結(jié)合患者M(jìn)ODS發(fā)生率，死亡發(fā)生率，血乳酸指標(biāo)來探討三種氣體分子在創(chuàng)傷初期炎癥反應(yīng)中的關(guān)系，從氣體信號(hào)分子角度了

3、解早期創(chuàng)傷發(fā)展情況。
　　方法:河北醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院急診科接診急性創(chuàng)傷患者60例。入選的創(chuàng)傷患者建立液路后，立即抽血，并送檢血?dú)夥治?。記錄患者血中乳?Lactic acid)數(shù)值。對(duì)患者基本情況進(jìn)行評(píng)價(jià)后，記錄患者創(chuàng)傷嚴(yán)重程度(injury severity score，ISS)評(píng)分，根據(jù)ISS創(chuàng)傷評(píng)分將其分為三個(gè)亞組:輕（＜16分）、中（16-25分）、重（＞25分）三組。同時(shí)取靜脈血約3ml，注入含分離膠的試管中，室溫靜

4、置20分鐘后，使用離心機(jī)離心20分鐘(3000轉(zhuǎn)/分)，仔細(xì)收集上清，分裝入3個(gè)離心（eppendorf，EP）管中（每個(gè)EP管內(nèi)樣品約100ul），于-80℃冰箱凍存?zhèn)溆?。?biāo)本收集全后，用iNOS、HO-1的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linked immuno sorbent assay，ELISA)試劑盒分別測定其血漿濃度，采用化學(xué)還原分光光度計(jì)法測血漿中H2S含量。并監(jiān)測患者后期多器官功能障礙綜合癥(multiple org

5、an dysfunctionsyndrome MODS)發(fā)生率（診斷標(biāo)準(zhǔn)為修正的Fry-MODS診斷標(biāo)準(zhǔn)）和28天死亡率，根據(jù)患者后續(xù)是否發(fā)生MODS，分為MODS組和非MODS組患者是否死亡，分為存活組和死亡組。
　　結(jié)果:
　　1三組創(chuàng)傷患者一般情況的比較
　　三組創(chuàng)傷病人的性別、年齡、自創(chuàng)傷發(fā)生至來院就診時(shí)間均無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。(P＞0.05)
　　2一氧化氮合酶iNOS、血紅素加氧酶HO-1、內(nèi)源性硫化氫

6、表達(dá)比較
　　通過方差分析，進(jìn)行組組間比較，均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。iNOS在三組患者血漿中表達(dá)較對(duì)照組均升高，并隨著創(chuàng)傷評(píng)分升高呈持續(xù)升高趨勢(P＜0.05)。HO-1在三組創(chuàng)傷患者血漿中表達(dá)較正常組均降低，創(chuàng)傷程度越重其在血漿中的表達(dá)水平越低，尤其創(chuàng)傷評(píng)分＞25分的第三組顯著性越大(P＜0.05)。內(nèi)源性硫化氫在血漿中含量較正常組降低。隨著創(chuàng)傷程度加劇其在血漿中的含量明顯低于正常對(duì)照組，呈持續(xù)降低趨勢差異具有顯著統(tǒng)計(jì)

7、學(xué)意義(P＜0.05)。
　　3三組患者血漿中iNOS、HO-1、內(nèi)源性硫化氫表達(dá)與血乳酸值比較
　　將所有創(chuàng)傷病人血漿中氣體信號(hào)分子表達(dá)濃度與血漿中血乳酸進(jìn)行直線回歸分析，結(jié)果顯示(1) iNOS與血乳酸呈正相關(guān)(β＞0)，(2)HO-1與血乳酸呈負(fù)相關(guān)(β＜0)，(3)內(nèi)源性硫化氫與血乳酸也成負(fù)相關(guān)(β＜0)。
　　4三組患者血漿中iNOS、HO-1、內(nèi)源性硫化氫表達(dá)與MODS發(fā)生率比較
　　4.1 MODS

8、組的血漿iNOS明顯高于MODS組具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05);
　　4.2 MODS組血漿HO-1明顯低于非MODS組且差異具有顯著性(P＜0.05);
　　4.3 MODS組血漿H2S明顯低于非MODS組且差異具有顯著性。
　　5三組患者血漿中iNOS、HO-1、內(nèi)源性硫化氫表達(dá)與死亡率比較:
　　5.1死亡組的血漿iNOS明顯高于存活組具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05);
　　5.2死亡組血漿HO-1明

9、顯低于存活組且差異具有顯著性(P＜0.05);(3)死亡組血漿H2S明顯低于存活組且差異具有顯著性。
　　結(jié)論:
　　1創(chuàng)傷早期血漿一氧化氮(NO)濃度異常升高及升高程度，血漿一氧化氮(CO)，血漿硫化氫(H2S)濃度降低及降低程度與ISS評(píng)分，組織的灌注不足，血乳酸升高有密切關(guān)系。后MODS的發(fā)生發(fā)展和預(yù)后密切相關(guān)，檢測血漿iNOS、血漿HO-1、血漿硫化氫水平可以作為參考指標(biāo)來評(píng)估早期創(chuàng)傷程度及預(yù)后情況;
　　2血