類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者CD34+造血干-祖細(xì)胞增殖相關(guān)信號(hào)分子表達(dá)異常.pdf

1、目的:探討類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoidarthritis)患者外周血CD34+造血干/祖細(xì)胞(hematopoieticstem/progenitorcell,HSC/HPC)數(shù)目變化。同時(shí),檢測(cè)RA患者外周血CD34+HSC/HPCWnt5a、Beta-catenin信號(hào)分子的基因表達(dá)水平,了解Wnt信號(hào)途徑分子基因表達(dá)的異常與臨床指標(biāo)的關(guān)聯(lián)性;檢測(cè)RA患者外周血CD34+HSC/HPC的核因子(nuclearfactorkB,

2、NFkB)kB1、kB2,P15INK4b信號(hào)分子的基因表達(dá)水平,了解NFkB信號(hào)途徑分子基因表達(dá)的異常與臨床指標(biāo)的關(guān)聯(lián)性。
　　方法:采用FITC熒光抗體標(biāo)記,以流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)34例RA患者和16例正常人外周血CD34+HSC/HPC,分析CD34+HSC/HPC占全部淋巴細(xì)胞的百分率。收集24例RA患者,9例正常對(duì)照組,分別抽取50ml抗凝外周血,淋巴細(xì)胞分離液分離單個(gè)核細(xì)胞,免疫磁珠分選CD34+HSC/HPC,Trizol

3、法提取總RNA,逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶反應(yīng)(real-timePCR)方法檢測(cè)患者組和對(duì)照組Wnt5a、β-catenin、NFkB1、NFkB2、P15INK4bmRNA表達(dá)水平的差異,并與DAS28評(píng)分、血沉、C反應(yīng)蛋白等相關(guān)性分析。
　　結(jié)果:
　　1)RA患者外周血CD34+HSC/HPC在淋巴細(xì)胞中所占的百分率[(0.13±0.09)％]比健康對(duì)照組顯著降低[(0.38±0.21)%,P=0.00],

4、差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2)正常對(duì)照組Wnt5a、β-cateninmRNA的表達(dá)分別是[144.86(0.14—252.06)]、(8.87±4.81),與正常對(duì)照組相比,RA患者組Wnt5amRNA表達(dá)低于正常對(duì)照組[1.15(0.09—71.52),P=0.004];β-cateninmRNA表達(dá)低于正常對(duì)照組[(4.96±4.52),P=0.037]。
　　3)正常對(duì)照組NFkB1的表達(dá)是[2.14(0.68—7.0

5、9)],與正常對(duì)照組相比,RA患者組NFkB1mRNA表達(dá)[6.57(1.08—76.71),P=0.013]高于正常對(duì)照組;NFkB2、P15INK4bmRNA表達(dá)與正常對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　4)RA患者外周血CD34+HSC/HPCWnt5a、β-catenin、NFkB1、NFkB2、P15INK4bmRNA表達(dá)與有無(wú)MTX的治療無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,與DAS28評(píng)分、血沉、C反應(yīng)蛋白等臨床指標(biāo)無(wú)相關(guān)性。
　　結(jié)論: