類風濕關節(jié)炎患者CD34+造血干-祖細胞增殖相關信號分子表達異常.pdf

1、目的:探討類風濕關節(jié)炎(rheumatoidarthritis)患者外周血CD34+造血干/祖細胞(hematopoieticstem/progenitorcell,HSC/HPC)數(shù)目變化。同時,檢測RA患者外周血CD34+HSC/HPCWnt5a、Beta-catenin信號分子的基因表達水平,了解Wnt信號途徑分子基因表達的異常與臨床指標的關聯(lián)性;檢測RA患者外周血CD34+HSC/HPC的核因子(nuclearfactorkB,

2、NFkB)kB1、kB2,P15INK4b信號分子的基因表達水平,了解NFkB信號途徑分子基因表達的異常與臨床指標的關聯(lián)性。
　　方法:采用FITC熒光抗體標記,以流式細胞術檢測34例RA患者和16例正常人外周血CD34+HSC/HPC,分析CD34+HSC/HPC占全部淋巴細胞的百分率。收集24例RA患者,9例正常對照組,分別抽取50ml抗凝外周血,淋巴細胞分離液分離單個核細胞,免疫磁珠分選CD34+HSC/HPC,Trizol

3、法提取總RNA,逆轉錄為cDNA,實時熒光定量聚合酶反應(real-timePCR)方法檢測患者組和對照組Wnt5a、β-catenin、NFkB1、NFkB2、P15INK4bmRNA表達水平的差異,并與DAS28評分、血沉、C反應蛋白等相關性分析。
　　結果:
　　1)RA患者外周血CD34+HSC/HPC在淋巴細胞中所占的百分率[(0.13±0.09)％]比健康對照組顯著降低[(0.38±0.21)%,P=0.00],

4、差異有統(tǒng)計學意義。
　　2)正常對照組Wnt5a、β-cateninmRNA的表達分別是[144.86(0.14—252.06)]、(8.87±4.81),與正常對照組相比,RA患者組Wnt5amRNA表達低于正常對照組[1.15(0.09—71.52),P=0.004];β-cateninmRNA表達低于正常對照組[(4.96±4.52),P=0.037]。
　　3)正常對照組NFkB1的表達是[2.14(0.68—7.0

5、9)],與正常對照組相比,RA患者組NFkB1mRNA表達[6.57(1.08—76.71),P=0.013]高于正常對照組;NFkB2、P15INK4bmRNA表達與正常對照組無統(tǒng)計學差異。
　　4)RA患者外周血CD34+HSC/HPCWnt5a、β-catenin、NFkB1、NFkB2、P15INK4bmRNA表達與有無MTX的治療無統(tǒng)計學差異,與DAS28評分、血沉、C反應蛋白等臨床指標無相關性。
　　結論: