紋狀體定向注射TaClo介導的大鼠行為學改變及其黑質中cox-2的表達.pdf

1、研究背景：帕金森病(parkinson disease，PD)是一種神經(jīng)變性所致的運動障礙性疾病，其癥狀嚴重程度與黑質多巴胺能神經(jīng)元的損傷相關，目前幾乎沒有一種藥物可以有效抑制帕金森病的病理進程。其病因目前不清，環(huán)境毒物可能是其主要病因。有機溶劑作為一種環(huán)境毒物廣泛存在于工作場所及周圍環(huán)境中，帕金森病與暴露于各種溶劑中有關，尤其是TCE（Tri chloro ethylene，TCE）。TCE是一種常用的工業(yè)溶劑，并且是水合氯醛的前體物

2、質，在環(huán)境中廣泛存在。有關研究表明，長期暴露于TCE可導致帕金森病的臨床癥狀，并在動物實驗中觀察到黑質多巴胺能神經(jīng)元的減少，其作用機制可能是通過TCE的代謝產(chǎn)物TaClo(1-trichloro methyl-1，2，3，4-tetrahydro-beta-carboline，TaClo)介導的。紋狀體定向注射是近幾年出現(xiàn)的帕金森病建模方法，藥物可通過軸突運輸至黑質從而引起黑質的病理改變，究竟TaClo紋狀體注射可否導致帕金森病行為學改

3、變國內外尚未見文獻報道。炎癥反應是否在此過程中發(fā)揮作用尚無定論。國內外目前無采用腦立體定向注射技術研究TaClo多巴胺能神經(jīng)毒性作用的文獻，并且國內尚無有關TaClo的動物實驗研究。本研究通過腦立體定向注射技術將TaClo注射至大鼠紋狀體，進而探討其多巴胺能神經(jīng)毒性作用機制是否與cox-2(cyclooxygenase-2，COX-2)表達有關。
　　目的：研究Wistar大鼠紋狀體定向注射TaClo后其行為學改變及黑質中cox-

4、2的表達及其意義。
　　方法：采用立體定向注射技術將溶于聚乙二醇(poly ethylene glycol，PEG)的TaClo(4μl，2.5μg/μl)分4個點注射到大鼠紋狀體，對照組注射PEG。于注射后7d、14d、21d、28d比較兩組大鼠日平均飲水量，采用自發(fā)活動視頻分析系統(tǒng)比較兩組大鼠活動總時間、活動總路程及活動軌跡的差異，取腦用于cox-2組織化學染色。
　　結果：實驗組大鼠紋狀體注射TaClo后逐漸開始出現(xiàn)P

5、D行為表現(xiàn)，并且飲水減少。實驗組大鼠日飲水量少于對照組(t=4.831，p=0.017)。實驗組大鼠平均活動路程明顯少于對照組(t=14.317，p=0.000)。兩組大鼠平均活動時間無差異(t=1.151，p=0.268)?；顒榆壽E顯示實驗組大鼠隨時間推移，活動減少，并且活動區(qū)域趨向于中間位置。實驗組大鼠黑質致密區(qū)有大量胞漿呈現(xiàn)棕褐色的cox-2陽性神經(jīng)細胞（主要為小膠質細胞），cox-2表達于神經(jīng)細胞（主要為小膠質細胞）胞漿中，染色

6、陽性的神經(jīng)細胞（小膠質細胞）細胞輪廓及其胞核清晰可見;對照組黑質致密區(qū)僅見極少棕褐色cox-2陽性細胞（主要為小膠質細胞），對照組黑質致密區(qū)cox-2陽性細胞數(shù)目明顯少于實驗組(P＜0.05)。另外，實驗組黑質致密區(qū)的非cox-2陽性細胞（主要為黑質致密區(qū)多巴胺能神經(jīng)元和星形膠質細胞）明顯少于對照組(P＜0.05)。
　　結論：環(huán)境神經(jīng)毒物TCE的代謝產(chǎn)物TaClo可以導致PD的行為學改變，其機制是通過cox-2介導的黑質的炎癥反