紋狀體定向注射TaClo介導(dǎo)的大鼠行為學(xué)改變及其黑質(zhì)中cox-2的表達(dá).pdf

1、研究背景：帕金森病(parkinson disease，PD)是一種神經(jīng)變性所致的運(yùn)動障礙性疾病，其癥狀嚴(yán)重程度與黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的損傷相關(guān)，目前幾乎沒有一種藥物可以有效抑制帕金森病的病理進(jìn)程。其病因目前不清，環(huán)境毒物可能是其主要病因。有機(jī)溶劑作為一種環(huán)境毒物廣泛存在于工作場所及周圍環(huán)境中，帕金森病與暴露于各種溶劑中有關(guān)，尤其是TCE（Tri chloro ethylene，TCE）。TCE是一種常用的工業(yè)溶劑，并且是水合氯醛的前體物

2、質(zhì)，在環(huán)境中廣泛存在。有關(guān)研究表明，長期暴露于TCE可導(dǎo)致帕金森病的臨床癥狀，并在動物實(shí)驗(yàn)中觀察到黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的減少，其作用機(jī)制可能是通過TCE的代謝產(chǎn)物TaClo(1-trichloro methyl-1，2，3，4-tetrahydro-beta-carboline，TaClo)介導(dǎo)的。紋狀體定向注射是近幾年出現(xiàn)的帕金森病建模方法，藥物可通過軸突運(yùn)輸至黑質(zhì)從而引起黑質(zhì)的病理改變，究竟TaClo紋狀體注射可否導(dǎo)致帕金森病行為學(xué)改

3、變國內(nèi)外尚未見文獻(xiàn)報道。炎癥反應(yīng)是否在此過程中發(fā)揮作用尚無定論。國內(nèi)外目前無采用腦立體定向注射技術(shù)研究TaClo多巴胺能神經(jīng)毒性作用的文獻(xiàn)，并且國內(nèi)尚無有關(guān)TaClo的動物實(shí)驗(yàn)研究。本研究通過腦立體定向注射技術(shù)將TaClo注射至大鼠紋狀體，進(jìn)而探討其多巴胺能神經(jīng)毒性作用機(jī)制是否與cox-2(cyclooxygenase-2，COX-2)表達(dá)有關(guān)。
　　目的：研究Wistar大鼠紋狀體定向注射TaClo后其行為學(xué)改變及黑質(zhì)中cox-

4、2的表達(dá)及其意義。
　　方法：采用立體定向注射技術(shù)將溶于聚乙二醇(poly ethylene glycol，PEG)的TaClo(4μl，2.5μg/μl)分4個點(diǎn)注射到大鼠紋狀體，對照組注射PEG。于注射后7d、14d、21d、28d比較兩組大鼠日平均飲水量，采用自發(fā)活動視頻分析系統(tǒng)比較兩組大鼠活動總時間、活動總路程及活動軌跡的差異，取腦用于cox-2組織化學(xué)染色。
　　結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組大鼠紋狀體注射TaClo后逐漸開始出現(xiàn)P

5、D行為表現(xiàn)，并且飲水減少。實(shí)驗(yàn)組大鼠日飲水量少于對照組(t=4.831，p=0.017)。實(shí)驗(yàn)組大鼠平均活動路程明顯少于對照組(t=14.317，p=0.000)。兩組大鼠平均活動時間無差異(t=1.151，p=0.268)?；顒榆壽E顯示實(shí)驗(yàn)組大鼠隨時間推移，活動減少，并且活動區(qū)域趨向于中間位置。實(shí)驗(yàn)組大鼠黑質(zhì)致密區(qū)有大量胞漿呈現(xiàn)棕褐色的cox-2陽性神經(jīng)細(xì)胞（主要為小膠質(zhì)細(xì)胞），cox-2表達(dá)于神經(jīng)細(xì)胞（主要為小膠質(zhì)細(xì)胞）胞漿中，染色

6、陽性的神經(jīng)細(xì)胞（小膠質(zhì)細(xì)胞）細(xì)胞輪廓及其胞核清晰可見;對照組黑質(zhì)致密區(qū)僅見極少棕褐色cox-2陽性細(xì)胞（主要為小膠質(zhì)細(xì)胞），對照組黑質(zhì)致密區(qū)cox-2陽性細(xì)胞數(shù)目明顯少于實(shí)驗(yàn)組(P＜0.05)。另外，實(shí)驗(yàn)組黑質(zhì)致密區(qū)的非cox-2陽性細(xì)胞（主要為黑質(zhì)致密區(qū)多巴胺能神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞）明顯少于對照組(P＜0.05)。
　　結(jié)論：環(huán)境神經(jīng)毒物TCE的代謝產(chǎn)物TaClo可以導(dǎo)致PD的行為學(xué)改變，其機(jī)制是通過cox-2介導(dǎo)的黑質(zhì)的炎癥反