γ-分泌酶組分基因APH-1A和PEN-2的轉錄調控.pdf

1、PS/γ-分泌酶負責老年癡呆癥相關蛋白β淀粉樣蛋白前體蛋白(APP)、信號轉導受體Notch和其他I型跨膜蛋白的剪切，其組成單位至少有四種：presenilins(PS，包括PS1和PS2)、nicastrin(NCT)、APH-1和PEN-2。盡管人們對這四種組分在蛋白質水平上的有機的相互調解作用已經有所了解，但是，關于它們的轉錄調控卻只知之甚少。在這項研究中，我們克隆了PEN-2和APH-1A兩種基因啟動子區(qū)，并通過熒光素酶活性分析

2、鑒定了這兩種基因啟動活性必需的最小啟動子區(qū)。序列分析表明，在這些區(qū)域存在許多潛在的轉錄因子的結合位點。點突變和膠遷移實驗揭示AP4和HIF-1結合到APH-1A啟動子上，而CREB結合到PEN-2啟動子上。進一步的研究表明，由forskolin激活的CREB顯著地促進PEN-2 mRNA和蛋白質的表達，而對γ-分泌酶的其他組分沒有影響。通過NiCl2處理(一種模擬缺氧的化學條件)激活HIF-1，APH-1A mRNA和蛋白質的水平顯著增