慢性心房顫動患者右心耳CD11b、IL-6和腫瘤壞死因子-α基因表達(dá)的研究.pdf

1、背景與目的:心房顫動(房顫，atrial fibrillation，AF)是臨床上常見的心律失常，易引起血流動力學(xué)紊亂，是缺血性腦卒中的主要原因之一。AF的發(fā)生與維持機(jī)制是一個多因素、多步驟的過程。近幾年取得了相當(dāng)?shù)倪M(jìn)展，但是其發(fā)生和維持的機(jī)制尚未完全明確。有研究顯示，非甾體類和甾體類抗炎藥能夠顯著降低AF的發(fā)生率，提示其機(jī)制可能與抑制心房肌的炎癥反應(yīng)有關(guān)系。而中性粒細(xì)胞粘附因子11b(CD11b)、白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子

2、-α(TNF-α)在炎癥的發(fā)生發(fā)展中起著關(guān)鍵的作用。本研究通過觀察CD11b、IL-6和TNF-α在竇性心律及伴有慢性心房顫動(AF)的風(fēng)濕性瓣膜病患者心肌中基因表達(dá)的改變，來探討各指標(biāo)與AF發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。 方法:選擇 36 例接受人工心臟瓣膜置換手術(shù)的風(fēng)濕性瓣膜病患者，分為兩組，其中竇性心律組12例，慢性房顫組24例，均在體外循環(huán)下進(jìn)行人工心臟瓣膜置換手術(shù)。于右心房打開后、體外循環(huán)插管前，獲取其右心耳心肌標(biāo)本組織，部分組織迅

3、速置入液氮中，然后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱保存待測，余下組織以10％福爾馬林溶液固定，石蠟包埋切片。以GAPDH為內(nèi)參照基因，采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)測定心房組織中CD11b、IL-6和 TNF-α的mRNA含量，用免疫組織化學(xué)SABC檢查評價IL-6和 TNF-α的表達(dá)情況。計量資料用配對t檢驗(yàn)；相關(guān)分析采用Pearson相關(guān)分析。 結(jié)果: 1．用免疫組織化學(xué)SABC法檢測慢性房顫組、竇性心律組心房肌細(xì)胞組

4、織，IL-6的陽性表達(dá)率分別為8.33％(1/12)、87.5％(21/24)，其表達(dá)積分分別為2.10±0.75分、0.81±0.81分，兩者比較，有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.001)，結(jié)合表達(dá)強(qiáng)度，2組心肌組織的IL-6表達(dá)強(qiáng)度亦存在顯著差異(P<0.001)：用RT-PCR技術(shù)檢測，可于420bp處見清晰的擴(kuò)增條帶，表達(dá)強(qiáng)度分別為1.47±0.47、0.74±0.23，兩兩比較，表達(dá)強(qiáng)度亦有顯著差異(P<0.001)。 2.用免

5、疫組織化學(xué)SABC法檢查慢性房顫組、竇性心律組心房肌細(xì)胞組織，TNF-Q的陽性表達(dá)率分別為16.67％(2/12)、87.5％(21/24)，其表達(dá)積分分別為2.32±0.81分、1.15±0.70分，兩者比較，有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.001)，結(jié)合表達(dá)強(qiáng)度，2組心肌組織的TNF-α表達(dá)強(qiáng)度亦存在顯著差異(P<0.001)；用RT-PCR技術(shù)檢測，可于325bp處見清晰的擴(kuò)增條帶，表達(dá)強(qiáng)度分別為1.72±0.97、0.74±0.28，兩兩

6、比較，表達(dá)強(qiáng)度亦有顯著差異(P<0.001)。 3.用RT-PCR技術(shù)檢測慢性房顫組、竇性心律組心房肌細(xì)胞組織中CD11b表達(dá)，可于450bp處見清晰的擴(kuò)增條帶，表達(dá)強(qiáng)度分別為1.49±0.35vs0.75±0.28，兩兩比較，表達(dá)強(qiáng)度有顯著差異(P<0.001)。 結(jié)論:1.風(fēng)濕性瓣膜病慢性房顫組心房組織IL-6和TNF-α蛋白質(zhì)表達(dá)程度顯著高于竇性心律組；CD11b、IL-6和TNF-α的mRNA表達(dá)顯著增加。