南海多棘海星抗腫瘤活性物質(zhì)的初步篩選研究.pdf

1、[目的]
　　 以南海多棘海星為材料，初步篩選具有NKT細(xì)胞激活劑特征的活性物質(zhì)和具有抑制腫瘤細(xì)胞生長的活性物質(zhì)。
　　 [方法]
　　 1.南海多棘海星粉碎后，用無水乙醇提取，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得乙醇提取物。
　　 2.用薄層板層析法確定層析分離的溶劑系統(tǒng)。
　　 3.利用硅膠柱層析分離技術(shù)對上述乙醇提取物按照極性進(jìn)行分離。
　　 4.體內(nèi)活性分析試驗：各組分分別通過腹腔注射小鼠，收集小鼠血清，檢

2、測細(xì)胞因子IL-4和IFN-r的水平。
　　 5.體外活性分析試驗：采用體外細(xì)胞毒試驗，將不同組分的提取物加入培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞中，分析海星提取物不同組分對腫瘤細(xì)胞的生長抑制和殺傷作用。
　　 [結(jié)果]
　　 1.分別優(yōu)選了硅膠柱層析分離南海多棘海星乙醇提取物及其組分Ⅲ的溶劑系統(tǒng)。
　　 2.對南海多棘海星乙醇提取物通過硅膠柱層析分離，獲取了8個組分(按照Rf值的不同)，Rf值分別為1.000、0.916、0

3、.708、0.625、0.516、0.316、0.115、0.000。對其中的組分Ⅲ進(jìn)一步的硅膠柱層析分離，獲取了4個亞組分(按照Rf值的不同)，Rf值分別為0.993、0.785、0.486、0.314。
　　 3.體內(nèi)試驗表明，南海多棘乙醇提取物的組分Ⅲ能刺激小鼠產(chǎn)生較高水平的IL-4(p<0.05)、IFN-γ(p<0.05)，組分Ⅲ的亞組分中Ⅲ-2、Ⅲ-4也能刺激小鼠產(chǎn)生較高水平的IL-4(p<0.05)、IFN-γ(p

4、<0.05)。
　　 4.體外細(xì)胞毒試驗顯示，南海多棘海星乙醇提取物的組分Ⅷ對腫瘤細(xì)胞的生長具有明顯的抑制作用。
　　 [結(jié)論]
　　 1.用硅膠柱層析技術(shù)從南海多棘海星乙醇提取物分離出8個組分，并從其中的組分Ⅲ中進(jìn)一步分離出4個亞組分。
　　 2.所分離的南海多棘海星乙醇提取物組分Ⅲ及其亞組分Ⅲ-2和Ⅲ-4具有刺激小鼠產(chǎn)生高水平的IL-4和IFN-γ，具有NKT細(xì)胞激活劑的作用特性，提示其中可能含有NK