內(nèi)皮祖細(xì)胞與噪音性耳聾耳蝸損傷的關(guān)系.pdf

1、目的:
　　 1、建立噪聲導(dǎo)致的內(nèi)耳損傷的動(dòng)物模型，在噪聲性耳聾的動(dòng)物模型上觀察聽(tīng)功能的變化、內(nèi)耳毛細(xì)胞的損傷情況，建立內(nèi)耳損傷修復(fù)的研究平臺(tái)。
　　 2、觀察外周血EPCs的變化和耳蝸血管紋中VEGF、iNOS在噪聲暴露后表達(dá)變化，闡述噪聲性耳聾的耳蝸組織損傷與修復(fù)過(guò)程中的發(fā)病機(jī)理。
　　 3、通過(guò)干預(yù)內(nèi)源性EPCs，探討對(duì)于噪聲性耳聾耳蝸損傷的預(yù)防和治療采取的措施。
　　 方法:
　　 取健康

2、體重約250g～300g成年SD大鼠應(yīng)用118±1dBSPL白噪聲持續(xù)暴露4小時(shí)建立噪聲性耳聾模型，實(shí)驗(yàn)分組為:對(duì)照組:未進(jìn)行噪聲暴露;噪聲暴露即刻組:噪聲暴露后即刻檢測(cè);噪聲暴露1天組:噪聲暴露后1天檢測(cè);噪聲暴露3天組:噪聲暴露后3天檢測(cè);噪聲暴露7天組:噪聲暴露后7天檢測(cè)，;噪聲暴露14天組:噪聲暴露后14天檢測(cè);各組均為10只;將試驗(yàn)分為兩部分，一為單純?cè)肼暠┞秾?duì)耳蝸損傷修復(fù)的影響，二為干預(yù)內(nèi)源性EPCs后噪聲暴露對(duì)耳蝸損傷修復(fù)

3、的影響。SD大鼠根據(jù)噪聲暴露后即刻組、1天組、3天組、7天組和14天組的分組分別檢測(cè)各組大鼠的ABR聽(tīng)閾改變、通過(guò)Fillo密度梯度離心法獲得單個(gè)核細(xì)胞流式細(xì)胞儀鑒定SD大鼠外周血中EPCs數(shù)量、通過(guò)Western印記和耳蝸冰凍切片免疫組化觀察耳蝸血管紋VEGF、iNOS和CD34的表達(dá)變化，同時(shí)對(duì)噪聲暴露后的耳蝸行掃描電鏡觀察。應(yīng)用EPO皮下注射提高內(nèi)源性EPCs數(shù)量、半胱氨酸飼料喂養(yǎng)制備內(nèi)源性EPCs數(shù)量降低的模型和NS皮下注射，分

4、別觀察SD大鼠噪聲暴露后即刻組、1天組、3天組、7天組、和14天組ABR聽(tīng)閾改變。
　　 結(jié)果:
　　 1、噪聲暴露后即刻組ABR閾值為最高，其聽(tīng)閾為86.67±6.85dBSPL，聽(tīng)力損傷最為明顯，屬于TTS期;噪聲暴露后7天和14天ABR閾值部分恢復(fù)，閾值降低，屬于PTS期，其聽(tīng)閾分別為為56.18±5.29 dBSPL和57.92±6.20dBSPL;
　　 2、對(duì)各組外周血中的EPCs進(jìn)行測(cè)定，觀察到EP

5、Cs于噪聲暴露后1天時(shí)最高，數(shù)值為91.40±8.13/20萬(wàn)個(gè)單核細(xì)胞;噪聲暴露后14天時(shí)EPCs恢復(fù)接近正常水平，數(shù)值為29.00±14.56/20萬(wàn)個(gè)單核細(xì)胞;
　　 3、免疫組化及Western印記表明噪聲暴露后1天VEGF和iNOS出現(xiàn)高峰，噪聲暴露后即刻組表達(dá)最低，CD34于噪聲暴露后3天和7天達(dá)到高峰;4、通過(guò)干預(yù)內(nèi)源性EPCs，EPCs升高組對(duì)于聽(tīng)力的保護(hù)作用明顯高于EPCs抑制組。
　　 4、EPCs在

6、內(nèi)耳損傷后的修復(fù)過(guò)程中，有促進(jìn)血管生成，改善內(nèi)耳微環(huán)境的作用，降低EPCs可以導(dǎo)致聽(tīng)力較為嚴(yán)重的下降，提高內(nèi)源性EPCs的釋放，可以保護(hù)耳蝸減輕噪聲對(duì)耳蝸的損傷加快耳蝸損傷后的恢復(fù)。
　　 結(jié)論:
　　 1、噪聲性耳聾最終可導(dǎo)致耳蝸損傷，隨著時(shí)間改變外周血中EPCs的數(shù)量也發(fā)生改變;
　　 2、VEGF、iNOS參與噪聲性耳聾損傷與修復(fù)的各個(gè)階段，VEGF和EPCs在噪聲損傷的耳蝸血管修復(fù)的不同階段均發(fā)揮作用;<