谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶-π基因轉(zhuǎn)導(dǎo)入人臍血造血干細胞對其抗腫瘤藥物耐藥性影響的研究.pdf

1、山東大學(xué)博士學(xué)位論文谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶-π基因轉(zhuǎn)導(dǎo)入人臍血造血干細胞對其抗腫瘤藥物耐藥性影響的研究姓名：楊興升申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：婦科腫瘤指導(dǎo)教師：江森2002.4.29山東大學(xué)博士學(xué)位論文中G S 丁 一 二 m R N A的表達。三、 體外耐藥試驗證實G S T 一 二 基因轉(zhuǎn)導(dǎo)對增強C D 3 4 + 細胞耐藥性的有效性后，將經(jīng) G S T 一 二 基因轉(zhuǎn)染的 C D 3 4 + 細胞移植至 經(jīng) 全身 放療 ( 劑 量為2 .

2、4 G y ) 的N O D / S L I D鼠 0 4 周 后開始 給予卡 鉑1 . 2 m g腹腔化療。 化療間隔周期為 4 周。于化療前、化療后第 4 天、第 7 天及第 1 4天檢測受體鼠 外周血白 細胞計數(shù)。 體外及體內(nèi) 試驗均以未經(jīng) G S T 一 二 基因轉(zhuǎn)染的 C D 3 4 + 細胞為對照組。結(jié)果: 來 源于G S T 一 二 基因轉(zhuǎn)染的C D 3 4 + 細胞的C F U - G M中， 3 0 % ( 3 / 1

3、 0 )經(jīng) R T - P C R檢測到 G S T 一 二 m R N A ，對照組中未檢測到 G S T - n m R N A 。免疫組織化學(xué)染色顯示， 來源于 G S T 一 二 基因 轉(zhuǎn)染的 C D 3 4 + 細胞的 C F U - G M中， 約 3 0 %的細胞 G S T 一 二 染色呈陽性，而對照組為陰性。體外耐藥試驗顯示， 藥物濃度為0 時 ， 實 驗組與 對照組C F U - G M及 B F U - E 無

4、 顯著性差異; 當(dāng)藥 物達到一定 濃度時 ， 經(jīng)G S T - : 基因 轉(zhuǎn)染的C D 3 4 + 細 胞， C F U - G M克隆 形成 數(shù)顯 著高 于對 照組。 當(dāng) 卡 鉑濃度) 3 u g / m l 時 ， 實 驗組C F U - G M數(shù)顯著高 于 對照組 ( P < 0 . 0 5 ) ; 當(dāng)A D M濃度為3 0 n g / m l 時 ， 實 驗組C F U - G M 數(shù)平均為4 5 . 7 士 3 .

5、5 ， 而 對照 組為2 1 . 7 士 2 . 5 ( P < 0 . 0 0 1 ) ， 當(dāng)A D M濃度為5 0 n g / m l 時，試驗組濃度為C F U - G M 數(shù)平均為 1 5 . 3 + 2 . 5 ， 而 對照組無C F U - G M 生長; 當(dāng)4 - H C2 . 5 u g / m l 時 ，1 . 2 ( P < 0 . 0 1 ) ， 當(dāng)4 - H C實驗組 C F U - G M 數(shù)平

6、均為4 2 . 3 士 3 . 1 ， 對照組為 1 3 . 7 士濃 度為5 . 0 a g / m l 時 ， 實 驗組C F U - G M數(shù) 平均為 1 3 . 7士 3 . 1 ， 對照組為。 。當(dāng) 卡 鉑濃 度為1 - 2 g g / m l 時， G S T 一 二 基因 轉(zhuǎn)染 組B F U - E形 成數(shù)明顯高于 對照組，當(dāng) 卡 鉑濃度為 超過 3 u g / m l 時， G S T 一 二 基因 轉(zhuǎn)染組與

7、非轉(zhuǎn)染組 B F U - E無顯著性差異。 A D M 及 4 - H C耐藥試驗中，G S T 一 二基因轉(zhuǎn)染組與對照組 B F U - E亦無顯著性差異。 在對卡鉑耐藥的 C F U - G M中， 7 0 % ( 7 / 1 0 ) 檢測到G S T - n m R N A ， 對A D M耐 藥的C F U - G M中， 8 0 % ( 8 / 1 0 )檢 測到G S T 一 二 m R N A , 對4 - ) ` &