人腫瘤壞死因子-α基因轉導對絨癌耐藥細胞系JEG-3-VP2耐藥性逆轉的體內(nèi)外研究.pdf

1、中國協(xié)和醫(yī)科大學博士學位論文人腫瘤壞死因子α基因轉導對絨癌耐藥細胞系JEG3VP2耐藥性逆轉的體內(nèi)外研究姓名：馮鳳芝申請學位級別：博士專業(yè)：婦產(chǎn)科學指導教師：楊秀玉向陽2002.9.1中髫醫(yī)學科學睫中星姆秘醫(yī)科大學j￡京按和醫(yī)院搏學位論文llllTNF旺基因轉導對絨癌耐藥細胞系JEG3_撐P2耐藥性逆轉的體內(nèi)外研究中文摘要目的：絨癌是發(fā)生于生育年齡婦女的高度惡性月中瘸，對化療敏感，是入類最早治愈的實體瘸之一?；熓蔷}癌的主要治療方法。對

2、化療藥物產(chǎn)生耐藥是治療失敗的主要原因。耐藥病人的死亡率仍穩(wěn)#徊戎60％左右，對黼藥患者的治療策略亟待受薪。緘瘞的耐藥多數(shù)勢獲褥性醚藥，溜擾逆轉孛瘩已經(jīng)形成懿多藥瓣藥，燕進一步提高絨癌洽療靜有效途徑。本斬究擬應甭蒺西工獠技術將細胞西子蘩因(huTNFn)導入已建立的絨癌耐藥細胞系JEG一3／VP2，觀察huTNFa旗因轉導對絨癌細胞耐藥性逆轉的體內(nèi)外作用。方法：本研寇用RTPCR的方法克隆huTNFG基因，綴酶切、連接烽huTNFa基因糖

3、入囊核表達載俸pcDNA31myehis()孛，提取屢粒，鼴潮棗子驀湊俸將huTNFd慕因?qū)司c癬耐藥細胞系JEG3／VP2牽，稻G418篩選含huTNFacDNA片段的單細胞克隆，襝測轉導后細胞對VP16耐藥指數(shù)的變化。用RTPCR的方法，測定轉導前后細胞MDRlmRNA的表達情況。建立絨癌耐藥細胞系裸鼠移植蠛模毅，測定轉導翦后移植瘦的癯重，用RTPCR方法瓢免痰組織化學方法，梭測huTNFa基因轉導后，絨瘞耐藥纓飚移楗瘤中MDRlm

4、RNA稚MDRI疆自(Pgp)表遮永平的改變。結果：轉導huTNFa基因的絨癌耐藥細胞中有huTNFamRNA的表達，對VP16的耐藥性與束轉導細胞相比明顯下降(Po05)MDRlmRNA的表達水乎明盥下降。轉導huTNFa基因灼絨痙瓣藥纓臌系的癯燕明顯低于寒轉導綴，差髯有疆著性(P磴。05)。轉導huTNF8蒸因熬移植癌耐藥性鞠顯下洚，MDRlmRNA和MDRl諼白表達永平萌箍低于采轉譯耐蓊細胞(P005)。結論：huTNFn基因的轉