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文檔簡介
1、目的:觀察體外分離培養(yǎng)的臍血與骨髓中間充質(zhì)干細(xì)胞和造血干細(xì)胞擴(kuò)增及向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)的特性,探討臍血與骨髓干細(xì)胞的差異和造血干細(xì)胞向成骨細(xì)胞的分化.方法:用密度梯度離心法體外分離、純化和培養(yǎng)臍血與骨髓中單個核細(xì)胞(MNC)和CD34+細(xì)胞,加入SCF和TPO促臍血CD34+細(xì)胞擴(kuò)增.在細(xì)胞貼壁后,加入地塞米松、β-甘油磷酸和抗壞血酸,向成骨細(xì)胞定向誘導(dǎo).用瑞氏染色、堿性磷酸酶(ALP)染色、骨鈣素和Ⅰ型膠原免疫組化染色、礦化結(jié)節(jié)染色和流式細(xì)
2、胞儀分型作為檢測手段,觀察臍血與骨髓中MNC和CD34+細(xì)胞的形態(tài)、生長特性、誘導(dǎo)分化和表面標(biāo)志的不同.結(jié)論:1、骨髓CD34+細(xì)胞低表達(dá)Stro-1,其中含有成骨細(xì)胞的前體細(xì)胞;臍血CD34+細(xì)胞高表達(dá)Stro-1,在體外只能能獲得極少的貼壁細(xì)胞,提示骨髓造血細(xì)胞與臍血造血細(xì)胞(CD34+細(xì)胞)的性質(zhì)不同.2、臍血中是否含有間充質(zhì)樣干細(xì)胞仍然是一個有爭議的問題,我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,臍血不能獲得典型的間充質(zhì)樣干細(xì)胞.3、臍血MNC體外培
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