相互易位攜帶者胚胎植入前診斷及極體活檢方法的建立.pdf

1、目的:分析透明帶激光法打孔法活檢卵裂球技術(shù)行植入前遺傳學(xué)診斷(PGD)的活檢成功率、活檢后囊胚形成率以及PGD周期的臨床妊娠結(jié)局，以評估透明帶激光打孔法的安全性和有效性。通過活檢極體行PGD可對母源性遺傳異常及單基因病進行診斷和篩查。該中心目前還未建立針對單基因并的極體活檢PGD平臺，因此在該中心建立一套安全、可靠的透明帶打孔極體活檢技術(shù)及極體全基因組擴增技術(shù)(WGA)十分必要。
　　方法:
　　1.回顧性分析2010年至2

2、013年在湘雅醫(yī)院生殖中心行透明帶激光打孔技術(shù)行卵裂球活檢的PGD周期中的活檢成功率、活檢后成囊率及臨床妊娠結(jié)局，評估透明帶激光打孔技術(shù)的效果;
　　2.透明帶激光打孔技術(shù)活檢極體;
　　3.活檢極體行WGA;
　　4.對極體擴增產(chǎn)物及母親外周血DNA行熒光PCR(PCR)擴增3個短串聯(lián)重復(fù)序列(STR)并掃描，評估WGA的效果。
　　結(jié)果:
　　1.透明帶激光打孔技術(shù)的活檢成功率為96.45％、活檢后成囊

3、率為37.58％、臨床妊娠率為30.00％。
　　2.利用透明帶激光打孔法對30枚多原核受精的廢棄胚胎行極體活檢，活檢組與對照組胚胎第三天優(yōu)胚形成率無差別。
　　3.隨機選取10枚多原核受精卵的20枚極體及4枚未受精卵的4枚極體行WGA，擴增成功率為95.45％(23/24)，等位基因脫扣（ADO）率為10.14％(7/69)。
　　結(jié)論:
　　1.透明帶激光打孔技術(shù)活檢卵裂球是一種安全、可靠的PGD活檢技術(shù);<