小腦性共濟(jì)失調(diào)癥患者谷氨酸受體d2基因突變研究.pdf

1、小腦性共濟(jì)失調(diào)是一組具有高度臨床和遺傳異質(zhì)性的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。病變部位主要在脊髓、小腦和腦干。本病表型復(fù)雜多樣，既有家族型，也有散發(fā)型病例。無(wú)論家族型還是散發(fā)型病例，均被證明與基因改變有關(guān)。最近，谷氨酸受體δ2基因（GluRδ2）證明在小腦功能中起著關(guān)鍵作用。GluRδ2顯著特點(diǎn)是高度表達(dá)于小腦蒲肯野細(xì)胞，且GluRδ2基因缺失或突變引起的癥狀與小腦性共濟(jì)失調(diào)極其相似。人類(lèi)GluRδ2基因定位于4q22，與小鼠GluRδ2基因的氨基

2、酸序列和核苷酸序列分別有97.0％、90.0％的同源性。盡管與小鼠相對(duì)應(yīng)基因有如此高的同源性，但是人類(lèi)GluRδ2基因未有報(bào)道，并且GluRδ2基因與人類(lèi)小腦性共濟(jì)失調(diào)的關(guān)系也未有報(bào)道。本次課題研究旨在探索人類(lèi)小腦性共濟(jì)失調(diào)患者是否有與小鼠GluRδ2基因相似的突變位點(diǎn)。 目的：探討小腦性共濟(jì)失調(diào)癥患者谷氨酸受體62（GluRδ2）基因突變的情況。 方法：采用PCR、瓊脂糖凝膠電泳、變性高效液相譜（DenaturingH

3、ighPerformanceLiquidChromatography，DHPLC）檢測(cè)及DNA測(cè)序方法，對(duì)小腦性共濟(jì)失調(diào)癥4家系17例患者及其16名無(wú)癥狀家系成員、7例散發(fā)型患者及36名正常人進(jìn)行GluRδ2基因突變分析。 結(jié)果：（1）GluRδ2基因4號(hào)內(nèi)含子4bp的缺失在遺傳型小腦性共濟(jì)失調(diào)患者、散發(fā)型小腦性共濟(jì)失調(diào)患者、無(wú)癥狀家系成員和正常人的頻率分別是5.88％、71.43％、17.65％和11.11％。散發(fā)型和遺傳型為

4、病例組，無(wú)癥狀家系成員和正常人為對(duì)照組進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)兩組GluRδ2基因4號(hào)內(nèi)含子4bp的缺失頻率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=0.85，P>0.05）；（2）GluRδ2基因9號(hào)外顯子1509單核苷酸位點(diǎn)T/G等位基因分布頻率病例組G占73.91％，T占26.08％，對(duì)照組G占81.81％，T占18.18％，兩組等位基因分布頻率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=1.28，P>0.05）；（3）GluRδ2基因13號(hào)內(nèi)含子（14號(hào)外顯子上游63b

5、p位點(diǎn)）C/G等位基因患者組C占71.74％，G占28.26％，正常對(duì)照組C占75.00％，G占25.00％，兩組等位基因比較無(wú)顯著差異（x2=0.007，P>0.05），差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：（1）雖然由于GluRδ2基因巨大，在大鼠頻繁發(fā)生自發(fā)突變，但在人類(lèi)該基因結(jié)構(gòu)相對(duì)穩(wěn)定，人類(lèi)小腦性共濟(jì)失調(diào)癥患者不發(fā)生外顯子缺失；（2）小腦性共濟(jì)失調(diào)患者（無(wú)論是家族性還是散發(fā)性）存在GluRδ2基因上述三種小片段內(nèi)含子缺失、多態(tài)現(xiàn)象