散發(fā)性脊髓小腦型共濟失調(diào)與多系統(tǒng)萎縮患者FMR1基因前突變分析.pdf

1、背景脆性X相關(guān)震顫/共濟失調(diào)綜合征(fragileX-associatedtremor/ataxiasyndrome，F(xiàn)XTAS)是一種以意向性震顫和/或小腦性共濟失調(diào)為主要特征的神經(jīng)退行性疾病。FXTAS的臨床表現(xiàn)為：進展性的小腦性共濟失調(diào)、意向性震顫、認知功能下降、帕金森病樣表現(xiàn)、自主神經(jīng)功能障礙、周圍神經(jīng)病變、精神異常等；頭部MRI表與為全腦萎縮、腦室擴大、小腦及皮質(zhì)下白質(zhì)病變和小腦中腳T2項高信號(middlecerebella

2、rpeduncles，MCP)；病理特征為：廣泛分布于腦神經(jīng)元及膠質(zhì)細胞內(nèi)的泛素化陽性的核內(nèi)包涵體(intranuclearinclusions)。FXTAS的致病基因FMR1定位于Xq27.3，在其5’端非編碼區(qū)有一個(CGG)n三核苷酸串聯(lián)重復(fù)序列，F(xiàn)MRl(CGG)n重復(fù)次數(shù)在人群中存在多態(tài)性。FMRlCGG重復(fù)次數(shù)為55～200時，稱為FMR1基因的前突變(premutation，PM)。FMRlPM可導(dǎo)致FMRlmRNA活性及

3、水平增加，核內(nèi)包涵體形成，部分FMRlPM攜帶者表現(xiàn)為FXTAS。
　　 目前，關(guān)于FXTAS尚沒有具體的流行病學(xué)資料，國外報道FMRlPM在正常男性中的攜帶率為0.12％(1/813)，在正常女性中攜帶率為0.38％(1/259)。PM攜帶率存在種族差異：在地中海人群中攜帶率較高，而在亞洲人群攜帶率低。歐、美洲等多項研究發(fā)現(xiàn)：大于50歲的散發(fā)性不明原因的小腦性共濟失調(diào)男性患者中FMRlPM的攜帶率為1.5％(16/1049)，

4、約是一般人群PM攜帶率的13倍；MSA小腦亞型(MSA-C)中FMRlPM攜帶率為0.8％(5/663)，也顯著高于一般人群。目前在亞洲小腦性共濟失調(diào)患者中缺少大規(guī)模FMRlPM的相關(guān)研究，新加坡Tan等人的研究未發(fā)現(xiàn)FMRIPM。目前，尚未有中國大陸不明原因的散發(fā)性脊髓小腦型共濟失調(diào)與多系統(tǒng)萎縮患者FMRlPM攜帶率的報道。
　　 目的：在中國大陸不明原因的散發(fā)性脊髓小腦型共濟失調(diào)與多系統(tǒng)萎縮患者中開展FMRl基因前突變分析。

5、
　　 方法：運用聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)，8％變性聚丙烯酰胺凝膠電泳和毛細管電泳方法（capillaryelectrophoresis，CE）對散發(fā)性不明原因的發(fā)病年齡大于45歲的68例SCA、32例MSA患者及100例正常人進行FMR1基因核苷酸重復(fù)次數(shù)的檢測，并對經(jīng)毛細管電泳檢測為純合子的8例女性患者及15例正常女性進行Southernblot檢測。
　　 結(jié)果：運用PCR、8％變性聚丙烯酰胺凝膠電泳、CE及Sou

6、thernblot方法在本組研究中未發(fā)現(xiàn)FMRlPM（CGG>55次），SCA與MSA患者中CGG重復(fù)范圍15-44次，其中最常見的CGG重復(fù)為28次，正常人中CGG重復(fù)范圍21-40次，其中最常見的CGG重復(fù)為27次。
　　 結(jié)論：
　　 l、首次在國內(nèi)運用PCR-毛細管電泳-southemblot技術(shù)進行FMR/CGG基因重復(fù)次數(shù)的檢測。
　　 2、中國大陸不明原因的散發(fā)性脊髓小腦型共濟失調(diào)FMR1基因前突變