異甘草素的高效提取及分離純化工藝研究.pdf

1、本文深入探索了酸水解、酶水解以及超聲提取法提取甘草中異甘草素以及應(yīng)用大孔吸附樹脂和聚酰胺柱層析分離純化異甘草素的工藝進行了系統(tǒng)研究。 1.確定反相高效液相色譜分析檢測甘草中異甘草苷和異甘草素的色譜條件為色譜柱為C18-ODS不銹鋼色譜柱(250mm×4.6mm，5μm，HPLCTechnologyLtd.日本)；檢測波長λ=360nm；流動相甲醇：0.4％H3PO4(1∶1)；柱溫30℃；流速1.0mL/min；進樣量10μL。

2、 2.研究了酸水解和酶法水解提取甘草中異甘草素的工藝，對影響水解過程的各個因素進行研究，確定最佳工藝參數(shù)。 酸水解法提取異甘草素最佳工藝參數(shù)為：1mol·L-1鹽酸，水解2h，水解溫度90℃，液固比5∶1。水解后堿中和pH至7，過濾后用80％乙醇提取濾渣，液固比10∶1，超聲20min，提取2次；乙酸乙酯萃取濾液，液液比1∶1，萃取2次。酸水解法提取異甘草素的提取率為2.46‰，浸膏中異甘草素含量為3.01％。

3、纖維素酶水解法提取甘草中異甘草素工藝參數(shù)為：pH=7(自然水)；酶濃度0.4mg/mL；酶催化時間48h；酶液體積：原料為8∶1(mL/g)；振蕩培養(yǎng)箱(搖速)100r/m。酶法水解提取甘草中異甘草素的提取率為2.98‰，分別是酸水解法提取的1.21倍，是直接索氏提取和直接超聲提取的11.07倍和10.38倍；浸膏中異甘草素含量為3.32％，分別是酸水解法提取的1.10倍，是直接索氏提取和直接超聲提取的10.64倍和11.92倍。

4、 3.確定了以酶法水解甘草原材料后，乙醇超聲提取異甘草素的優(yōu)化工藝條件為：80％乙醇，液固比10∶1，超聲10min，提取3次。提取率為3.11‰，浸膏中異甘草素含量為3.55％。 4.應(yīng)用ADS系列大孔吸附樹脂對異甘草素進行分離純化，確定了最佳樹脂ADS-F8吸附與解吸附工藝條件：吸附：pH=7，吸附溫度20℃，流速1.5mL/min；解吸附：15％乙醇溶液100mL預(yù)洗脫除雜，然后以80％乙醇為洗脫劑，流速1.5mL/mi