基于抑制性因子作用探討三物白散抗腫瘤免疫調(diào)節(jié)機(jī)制.pdf

1、目前研究表明機(jī)體的免疫狀態(tài)是決定著腫瘤發(fā)展、轉(zhuǎn)移的主要因素，所以機(jī)體抗腫瘤免疫的病理生理機(jī)制越來(lái)越受關(guān)注。如果把腫瘤看成為“邪”的范疇，那機(jī)體的免疫狀態(tài)就是“正”的范疇，這與中醫(yī)學(xué)“邪正”理論密切相關(guān)。隨著對(duì)腫瘤病理生理逐步深入的研究，“邪正”的內(nèi)涵也隨之有了新的認(rèn)識(shí)。而祛邪法作為針對(duì)這些邪氣的治療方法，在抗腫瘤過(guò)程中的作用機(jī)制也隨之不斷被闡述，在臨床也因此被不斷廣泛運(yùn)用。
　　 由于細(xì)胞因子參與抗腫瘤免疫的各個(gè)環(huán)節(jié)，并起著十分

2、重要的作用。因此不同細(xì)胞因子介導(dǎo)的機(jī)體免疫狀態(tài)及其介導(dǎo)的機(jī)制成為了研究的熱點(diǎn)。
　　 其中抑制性細(xì)胞因子在腫瘤發(fā)展轉(zhuǎn)移過(guò)程扮演著重要的角色，主要以IL-4、IL-6、IL-10等Th2型細(xì)胞因子以及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)以及前列腺素E2(PGE2)為代表。目前研究證實(shí)這類(lèi)因子可誘導(dǎo)機(jī)體處于免疫抑制狀態(tài)從而促進(jìn)腫瘤的發(fā)展、轉(zhuǎn)移，屬于中醫(yī)“邪”的范疇。
　　 基于上述認(rèn)識(shí)，本實(shí)驗(yàn)在前期研究證實(shí)三物白散可通過(guò)逆轉(zhuǎn)Th1/

3、Th2型細(xì)胞因子、降低VEGF表達(dá)、促進(jìn)巨噬細(xì)胞分泌Th1型細(xì)胞因子IL-1β、TNF-α而降低抑制性因子IL-6的分泌以實(shí)現(xiàn)免疫正相調(diào)節(jié)作用的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步探討該方在抗腫瘤過(guò)程中能否通過(guò)影響TGF-β以及PGE2的分泌而達(dá)到免疫調(diào)節(jié)作用。
　　 實(shí)驗(yàn)研究部分首先對(duì)三物白散制備工藝進(jìn)行改進(jìn)，主要是巴豆霜的制備。再?gòu)恼w水平研究巴豆油含量不同的三物白散的抗腫瘤效應(yīng)。分別制備巴豆霜含油量為5％、10％、20％的三物白散(以下簡(jiǎn)稱(chēng)5％

4、、10％、20％藥物組)進(jìn)行抗腫瘤效用研究并用CTX組進(jìn)行對(duì)照。結(jié)果表明陽(yáng)性對(duì)照組和巴豆油含量不同的三物白散皆有明顯的抗腫瘤效應(yīng)，其中以巴豆霜含油量為10％藥物組抗腫瘤功效最佳，胸腺及脾臟指數(shù)表明其能明顯改善機(jī)體的免疫狀態(tài)。并用ELISA方法對(duì)正常組及各組血清中TGF-β1以及PGE2含量進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，模型組的TGF-β1顯著高于正常組，表明荷瘤體確實(shí)存在免于抑制狀態(tài)，藥物組TGF-B1以及PGE2含量與模型組和陽(yáng)性對(duì)照組相比，皆

5、不同程度降低，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明三物白散可通過(guò)影響荷瘤鼠體內(nèi)TGF-β1、PGE2的分泌來(lái)調(diào)節(jié)免疫，且仍以10％藥物組效果最好。
　　 再用整體水平抗腫瘤效應(yīng)較好的5％、10％藥物組進(jìn)行體外研究。藥物等比稀釋成不同濃度干預(yù)腫瘤細(xì)胞，結(jié)果表明新法制備的三物白散在體外同樣具有明顯的抑瘤效應(yīng)，并與藥物濃度呈正相關(guān)，且10％優(yōu)于5％藥物組。對(duì)藥物作用后上清中TGF-β1、PGE2的含量進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果同樣表明三物白散可減少兩者的產(chǎn)生