胞外核苷酸抗食管癌Eca-109和肝癌SMMC-7721細(xì)胞增殖及其分子機(jī)制的研究.pdf

1、三磷酸腺苷(ATP)及其相關(guān)化合物是許多細(xì)胞胞外信息傳遞并廣泛存在的信號(hào)物質(zhì)，通過與細(xì)胞膜上的特異性嘌呤嘧啶受體(P受體)結(jié)合，調(diào)節(jié)細(xì)胞的多種生理生化功能。在腫瘤、細(xì)胞凋亡、局部缺血、炎癥、傷口愈合及疼痛等病理狀態(tài)下，P受體的內(nèi)源性配體亦發(fā)揮著重要的作用。P受體可分成P1和P2兩類。P1受體的內(nèi)源性配體主要是腺苷(ADO)，P2受體的內(nèi)源性配體主要有ATP、二磷酸腺苷(ADP)、三磷酸尿苷(UTP)和二磷酸尿苷(UDP)等。到目前為止，

2、P1受體可分為A1、A2a、A2B和A3四種亞型，屬G蛋白偶聯(lián)受體，具有獨(dú)特的組織學(xué)分布和藥理學(xué)特性；P2受體可再分為兩類，即配體門控離子通道型受體(P2X受體)和G蛋白偶聯(lián)型受體(P2Y受體)。分子生物學(xué)研究結(jié)果顯示：P2X受體包括七種亞型，即P2X1～7；P2Y受體包括P2Y1、P2Y2、P2Y4、P2Y6、P2Y11、P2Y12、P2Y13、P2Y14八種亞型。 近年來，國內(nèi)外學(xué)者對(duì)ATP及其相關(guān)化合物的抗腫瘤作用十分重視

3、，先后報(bào)道了此類物質(zhì)對(duì)不同類型白血病、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、黑色素瘤、肝細(xì)胞癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、前列腺癌、食管癌、胃癌等的體內(nèi)、外實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果。Rapaport最早報(bào)道了腺苷酸的抗腫瘤活性。在多種生長迅速的侵襲性腫瘤模型，荷瘤小鼠腹腔注射AMP、ADP或ATP具有顯著的抗腫瘤作用。胞外ATP對(duì)小鼠的抗腫瘤活性并非源于ATP介導(dǎo)的宿主免疫力增強(qiáng)，而是胞外ATP直接作用于腫瘤組織。有關(guān)ATP體內(nèi)、外抗腫瘤細(xì)胞生長的分子機(jī)制目前尚不十分清楚，大多

4、數(shù)研究認(rèn)為此作用可能與細(xì)胞凋亡有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)室曾研究報(bào)道了ATP和ADO對(duì)人食管低分化鱗癌細(xì)胞株TE-13和人胃未分化腺癌細(xì)胞株HGC-27的作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，ATP和ADO對(duì)上述腫瘤細(xì)胞均有抑制增殖的作用，且強(qiáng)度相似，并可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，提示ATP的上述作用可能與其降解產(chǎn)物ADO部分相關(guān)；并發(fā)現(xiàn)P2Y1和P2Y2受體mRNA在食管癌細(xì)胞中有表達(dá)。而Maaser等報(bào)道ATP通過P2Y2受體抑制中分化食管癌Kyse-140細(xì)胞的增殖，并誘導(dǎo)其凋

5、亡，ADO幾乎無此作用。Wen等發(fā)現(xiàn)ATP對(duì)肝細(xì)胞癌Li-7A細(xì)胞有抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡的作用，該作用是ATP降解為ADO并通過激動(dòng)A3受體而發(fā)揮的。 食管鱗癌細(xì)胞株Eca-109和肝癌細(xì)胞株SMMC-7721系來源于我國癌癥病人的腫瘤細(xì)胞株，目前尚未見ATP對(duì)這兩株腫瘤細(xì)胞的研究報(bào)道，本文以上述兩株腫瘤細(xì)胞作用研究對(duì)象，觀察了ATP對(duì)其的增殖抑制及誘導(dǎo)凋亡作用，同時(shí)觀察了P2受體亞型mRNA在食管癌Eca-109細(xì)胞中的表達(dá)，以