白塞病與HLAⅠ、Ⅱ類(lèi)基因多態(tài)性及血清瘦素、可溶性瘦素受體相關(guān)性研究.pdf

1、白塞病(Behcet’sdisease，BD)又稱白塞綜合征，是一種慢性多系統(tǒng)受累的自身免疫性疾病，1937年由土耳其皮膚病醫(yī)師HulusiBehcet首先描述，該病以復(fù)發(fā)性口腔潰瘍、生殖器潰瘍、眼部損害及皮膚損害為主要特征，也可伴有關(guān)節(jié)、血管、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、胃腸道、心臟、腎臟、肺臟、附睪等多器官受累。BD在世界各地均有分布，以東亞、中東、地中海沿岸等國(guó)家發(fā)病率較高，故又稱為絲綢之路病，我國(guó)北方發(fā)病率不低于14/10萬(wàn)。雖然BD的基本病

2、理改變是一種血管炎，但BD的確切病因尚不明確。國(guó)內(nèi)外關(guān)于BD的遺傳流行病學(xué)研究結(jié)果顯示該病具有明顯的遺傳傾向和家族聚集特點(diǎn)，同時(shí)感染因素、環(huán)境因素、精神因素、免疫因素等在其發(fā)病及病情進(jìn)展過(guò)程中亦起重要作用，其發(fā)病機(jī)制可能是具有一定遺傳易感性的個(gè)體，在感染等因素的作用下，引起機(jī)體免疫功能失調(diào)而導(dǎo)致該病的發(fā)生。 人類(lèi)主要組織相容性復(fù)合體(majorhistocompatibilitycomplex，MHC)又稱人類(lèi)白細(xì)胞抗原(hum

3、anleukocyteantigen，HLA)基因或HLA基因復(fù)合體，是位于人類(lèi)第6號(hào)染色體短臂(6p21.31)緊密連鎖的基因群，長(zhǎng)約3600kb，是迄今為止所知的人類(lèi)最復(fù)雜的顯性多態(tài)遺傳系統(tǒng)?，F(xiàn)已在此遺傳系統(tǒng)中確定了224個(gè)基因位點(diǎn)，等位基因數(shù)目達(dá)1500個(gè)，其編碼產(chǎn)物-HLA抗原在免疫應(yīng)答過(guò)程中起著非常重要的作用。編碼HLA抗原的基因群主要有3類(lèi)：HLAⅠ類(lèi)基因區(qū)位于6p的端粒側(cè)，包括HLA-A、B、C及其它一些功能未明的基因和假

4、基因，其編碼的Ⅰ類(lèi)抗原存在于所有的有核細(xì)胞表面，主要功能是識(shí)別和遞呈內(nèi)源性抗原肽給CD8+T細(xì)胞；HLAⅡ類(lèi)基因區(qū)位于6p近著絲點(diǎn)一端，結(jié)構(gòu)最為復(fù)雜，主要包括DR、DQ、DP三個(gè)亞區(qū)。其編碼的Ⅱ類(lèi)抗原主要存在于某些免疫細(xì)胞表面，如抗原遞呈細(xì)胞、成熟B細(xì)胞、活化T細(xì)胞等，主要功能是識(shí)別和遞呈外源性抗原肽給CD4+T細(xì)胞。HLA-DR是目前發(fā)現(xiàn)的主要HLAⅡ類(lèi)分子，而決定HLA-DR特異性的主要編碼基因是具有高度多態(tài)性的DRB1座位。HLA

5、Ⅲ類(lèi)基因區(qū)位于HLAⅠ、Ⅱ類(lèi)基因區(qū)之間，主要由一些與補(bǔ)體成分和某些炎癥細(xì)胞因子編碼相關(guān)的基因組成。研究表明HLA基因與多種自身免疫性疾病的關(guān)聯(lián)程度超過(guò)人類(lèi)基因組中其它任何區(qū)域，是機(jī)體對(duì)疾病易感的主要遺傳成分。 瘦素(leptin)是由肥胖基因(obesegene)編碼的相對(duì)分子量為16000的多肽類(lèi)激素，主要由脂肪組織分泌，通過(guò)多種組織和多種形式的瘦素受體作用于中樞和外周的多個(gè)位點(diǎn)，影響機(jī)體的許多生理和代謝過(guò)程，其主要生物學(xué)效應(yīng)

6、包括：抑制食欲、減少攝食、增強(qiáng)能量消耗、抑制脂肪合成、調(diào)節(jié)體重、影響生育等，與肥胖、高脂血癥、高血壓病、糖尿病、冠心病等密切相關(guān)。最近的研究發(fā)現(xiàn)瘦素作為神經(jīng)—內(nèi)分泌—免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)中的一個(gè)重要成員，也參與免疫調(diào)節(jié)，可促進(jìn)未活化T細(xì)胞的增殖和白細(xì)胞介素(interleukin，IL)-2的分泌，并促進(jìn)記憶性CD4+T細(xì)胞分泌干擾素(interferon，IFN)-γ、抑制其分泌IL-4，因此瘦素具有促進(jìn)Th1細(xì)胞應(yīng)答，抑制Th2細(xì)胞應(yīng)答的特

7、點(diǎn)，在自身免疫性疾病的發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮重要作用。 瘦素需與特異的受體結(jié)合才能發(fā)揮其生物學(xué)作用，瘦素受體屬于Ⅰ類(lèi)細(xì)胞因子受體家族，細(xì)胞因子受體具有產(chǎn)生可溶性受體，以結(jié)合蛋白的形式在血液中循環(huán)而發(fā)揮生理功能的特征。瘦素受體共有6種不同的亞型，即ob-Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Rf。ob-Rb為長(zhǎng)型受體，具有瘦素受體所有的功能區(qū)，是執(zhí)行瘦素功能的主要受體，其它為短型受體，其中ob-Re具有結(jié)合游離瘦素而緩沖其血循環(huán)濃度的作用，是瘦素

8、受體的可溶性形式?？扇苄允菟厥荏w(solubleleptinreceptor，sLR)可作為跨膜受體信號(hào)的生物調(diào)節(jié)因子，也可作為載體蛋白運(yùn)送瘦素通過(guò)血腦屏障作用于下丘腦，還可以影響腎小球?yàn)V出而減少瘦素的降解和清除，在體內(nèi)sLR與瘦素存在著反饋調(diào)節(jié)機(jī)制。而且其產(chǎn)生受ob-Ra、Rb表達(dá)的影響，其血清水平可以反映瘦素受體基因在組織中的表達(dá)。因此sLR是檢測(cè)瘦素生物活性及瘦素受體表達(dá)的有用工具。 本研究從遺傳因素和免疫因素人手，對(duì)BD

9、的病因和發(fā)病機(jī)制進(jìn)行研究。首先應(yīng)用目前世界上最先進(jìn)的HLA基因分型方法-LABTypeTMSSO技術(shù)(又稱序列微珠綜合分析實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，Lambdaarraybeadsmulti-analyticsystem，LABMASTM)對(duì)40例遼寧籍漢族BD患者及100例種族、地域與病例組匹配的正常對(duì)照組的HLAⅠ類(lèi)基因的A、B位點(diǎn)和HLAⅡ類(lèi)基因的DRB1位點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)，以探討HLAⅠ、Ⅱ類(lèi)基因與BD的遺傳易感性及其臨床表現(xiàn)的相關(guān)性。同時(shí)分別應(yīng)用放

10、射免疫分析法(radioimmunoassay，RIA)及酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(enzymelinkedimmunosorbenassay，ELISA)對(duì)40例BD患者及30例性別、年齡、體重指數(shù)(bodymassindex，BMI)與病例組匹配的正常對(duì)照組血清瘦素及sLR水平進(jìn)行檢測(cè)，以探討瘦素及sLR在BD免疫發(fā)病機(jī)理中的作用。 經(jīng)研究得出結(jié)論： 1.HLA-B*51等位基因可能是遼寧籍漢族BD的易感基因。 2.

11、HLAⅠ類(lèi)基因?qū)D的臨床表現(xiàn)可能發(fā)揮重要作用，其中HLA-A*02等位基因可能是BD患者出現(xiàn)毛囊炎樣皮損的保護(hù)性基因，HLA-A*29等位基因可能是BD患者出現(xiàn)關(guān)節(jié)受累的易感基因，HLA-B*51等位基因可能是BD患者出現(xiàn)皮膚針刺反應(yīng)陽(yáng)性的易感基因，HLA-B*35等位基因可能是BD患者出現(xiàn)生殖器潰瘍的易感基因。 3.HLA-DRB1*14等位基因可能是遼寧籍漢族BD的易感基因，而HLA-DRB1*15等位基因可能是遼寧籍漢族

12、BD的保護(hù)性基因。 4.HLAⅡ類(lèi)基因?qū)D的臨床表現(xiàn)可能發(fā)揮重要作用，其中HLA-DRB1*15等位基因可能是BD患者發(fā)生生殖器潰瘍的保護(hù)性基因，HLA-DRB1*14等位基因可能是BD患者出現(xiàn)毛囊炎樣皮損、結(jié)節(jié)性紅斑樣皮損的易感基因，HLA-DRB1*14等位基因可能是發(fā)病年齡小于20歲年齡組患者的易感基因，而HLA-DRB1*15等位基因可能是該年齡組患者的保護(hù)性基因。 5.BD患者血清瘦素水平存在異常，瘦素可能參

13、與了BD的發(fā)生與發(fā)展。 6.活動(dòng)期與穩(wěn)定期BD患者血清瘦素水平存在差異，血清瘦素水平的變化可能是反應(yīng)BD活動(dòng)的指標(biāo)。 7.有關(guān)節(jié)受累與無(wú)關(guān)節(jié)受累BD患者血清瘦素水平存在差異，瘦素可能參與了BD關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制。 8.BD患者血清sLR水平存在異常，sLR可能阻止了BD的發(fā)生與發(fā)展。 9.有關(guān)節(jié)受累與無(wú)關(guān)節(jié)受累BD患者血清sLR水平存在差異，sLR可能阻止了BD關(guān)節(jié)炎的發(fā)病。 10.血清sLR水平與