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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
1.探討丙戊酸鈉(sodium valproate, VPA)對(duì)絨癌細(xì)胞的增殖抑制作用;
2.研究VPA對(duì)5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)抗腫瘤的增效作用;
3.根據(jù)VPA與5-FU聯(lián)合作用對(duì)凋亡相關(guān)基因survivin mRNA表達(dá)的影響,初步探討二者聯(lián)用的抗腫瘤機(jī)制。
方法:
體外培養(yǎng)人絨癌JEG-3細(xì)胞株,分為VPA組(濃度為0.2
2、5,0.50,1.00,2.00,4.00,8.00,16.00mmol/L)、5-FU組(濃度為2.5,5.0,10.0,20.0,40.0,80.0,160.0μg/mL)、VPA+5-FU組(VPA1.00mmol/L處理后分別予5-FU2.5,5.0,10.0,20.0,40.0,80.0,160.0μg/mL)和對(duì)照組(藥物濃度為0mmol/L)。(1)四甲基偶氮唑藍(lán)比色法(MTT)檢測(cè)細(xì)胞增殖抑制率;(2)Annexin V
3、/碘化丙啶(propidiumiodide, PI)染色及流式細(xì)胞術(shù)(FCM)分析細(xì)胞凋亡率;(3)逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR)檢測(cè)各組細(xì)胞中survivin基因的轉(zhuǎn)錄水平。
結(jié)果:
1.VPA組JEG-3細(xì)胞增殖抑制率為4.11±0.47%~89.33±1.21%,比對(duì)照組明顯升高(P<0.05),該作
4、用具有時(shí)間-濃度依賴性;細(xì)胞凋亡率(4.73±0.14%)亦較對(duì)照組(0.94±0.06%)明顯升高(P<0.05)。
2.VPA+5-FU組細(xì)胞的增殖抑制率為40.58±0.47%~97.61±0.40%,凋亡率為38.44±0.36%~56.97±0.61%,均比同濃度5-FU組(抑制率37.41±0.53%~61.96±0.92%,凋亡率8.31±0.13%~26.39±0.35%)顯著提高(P<0.05)。
5、 3.VPA+5-FU組細(xì)胞survivin基因的相對(duì)表達(dá)量為0.32±0.07~0.79±0.06,均比同濃度5-FU組(0.84±0.07~1.23±0.12)明顯降低(P<0.05)。
結(jié)論:
1.VPA對(duì)人絨癌JEG-3細(xì)胞具有抑制增殖及誘導(dǎo)凋亡的作用,其增殖抑制作用具有時(shí)間-濃度依賴性;
2.較低濃度的VPA能增強(qiáng)5-FU對(duì)人絨癌JEG-3細(xì)胞的抗腫瘤作用;
3.V
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