奧曲肽聯(lián)合順鉑和5-氟尿嘧啶對人肺腺癌細胞株A549體外和體內(nèi)生長的影響.pdf

1、第一部分
　　目的：探討生長抑素類似物奧曲肽能否增強人肺腺癌細胞株A549對化療藥物的敏感性。
　　 方法：運用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測奧曲肽、順鉑和5-氟尿嘧啶單獨及聯(lián)合作用對A549細胞生長的影響,并用Isobologram分析評價藥物聯(lián)合應(yīng)用的作用性質(zhì)。
　　 結(jié)果：MTT法結(jié)果顯示奧曲肽對A549細胞生長有抑制作用,在濃度1.3mg/L～166.7mg/L范圍內(nèi),呈劑量和時間依賴性;其與順鉑和5-氟

2、尿嘧啶共同作用后,對A549細胞的抑制作用明顯增高,比奧曲肽單用及順鉑、5-氟尿嘧啶兩藥聯(lián)合作用具有顯著性差異(P＜0.05),其IC50的效應(yīng)點落在Isobologram圖中的協(xié)同區(qū)域。
　　 結(jié)論：在體外實驗中,奧曲肽能夠抑制人肺腺癌細胞A549增殖,且聯(lián)合順鉑和5-氟尿嘧啶后對A549細胞生長抑制作用增強,三種藥物相互作用為協(xié)同作用。奧曲肽能提高A549細胞對化療藥物順鉑和5-氟尿嘧啶的敏感性。
　　第二部分

3、>　　 目的：觀察生長抑素類似物奧曲肽聯(lián)合節(jié)拍化療對人肺腺癌細胞株A549的凋亡和周期的影響及p53蛋白是否參與藥物聯(lián)合作用的過程。
　　 方法：采用流式細胞術(shù)檢測A549細胞的凋亡和周期,Westemblot檢測p53蛋白的表達情況。
　　 結(jié)果：各實驗組經(jīng)藥物處理48h后,流式細胞儀檢測結(jié)果明示奧曲肽、順鉑和5-Fu對A549細胞周期和凋亡都有影響。奧曲肽使S、G2期細胞數(shù)增多,DDP使Gl期細胞增多,5-Fu、順

4、鉑聯(lián)合5-Fu和三藥聯(lián)合作用使細胞阻滯在S期。順鉑聯(lián)合5-Fu和三藥聯(lián)合作用對A549細胞的晚期凋亡明顯高于藥物單獨作用的效果,有顯著性差異(P＜0.05);三藥聯(lián)合與順鉑聯(lián)合5-Fu相比有顯著性差異(P＜0.05)。Westernblot結(jié)果示三種藥物作用A549細胞后p53蛋白表達增加,三種藥物聯(lián)合作用后p53蛋白表達最高,與順鉑聯(lián)合5-Fu相比有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：流式細胞術(shù)的結(jié)果表明三種藥物對A54

5、9細胞周期和凋亡都有影響,三種藥物聯(lián)合作用時效果最明顯,且p53蛋白參與藥物聯(lián)合作用的過程。
　　 第三部分
　　 目的：探討奧曲肽聯(lián)合順鉑和5-FU對A549荷瘤裸鼠的抗血管生成作用。
　　 方法：建立A549荷瘤動物模型,分為對照組、奧曲肽組、順鉑組、5-FU組、順鉑+5-FU組和奧曲肽+順鉑+5-FU組,分別給予生理鹽水、奧曲肽、順鉑、5-FU治療5周后,處死裸鼠,取腫瘤組織用免疫組化檢測微血管密度(MVD