胞核M-CSF對(duì)人宮頸癌HeLa細(xì)胞藥物抗性的影響.pdf

1、目的：探討胞核M-CSF對(duì)人宮頸癌HeLa細(xì)胞藥物抗性的影響。
　　方法：分別以濃度為0.2μg/mL、2.0μg/mL、20μg/mL的順鉑或紫杉醇孵育HeLa細(xì)胞、HeLa-M細(xì)胞（M-CSF穩(wěn)定轉(zhuǎn)染并在核定位表達(dá)的HeLa細(xì)胞）、HeLa-C細(xì)胞（空載體穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的HeLa細(xì)胞）48小時(shí)后，MTT法檢測細(xì)胞相對(duì)活性、臺(tái)盼蘭拒染法測細(xì)胞存活率。分別以濃度為0.2μg/mL、2.0μg/mL、20μg/mL的順鉑或紫杉醇孵育HeL

2、a-M細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、HeLa-C細(xì)胞2小時(shí)后高效液相色譜法測細(xì)胞內(nèi)順鉑和紫杉醇藥物濃度；Western Blot檢測Bcl-2蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：MTT比色法及臺(tái)盼蘭細(xì)胞計(jì)數(shù)法測定結(jié)果顯示：在順鉑或紫杉醇濃度為2.0μg/mL、20.0μg/mL時(shí)，HeLa-M細(xì)胞對(duì)順鉑或紫杉醇的抗性顯著高于HeLa細(xì)胞、和HeLa-C細(xì)胞（p<0.01）,當(dāng)順鉑或紫杉醇濃度為0.2μg/mL時(shí)，三種細(xì)胞對(duì)順鉑或紫杉醇的抗性無明顯差別(

3、p>0.05)。在順鉑或紫杉醇三種濃度處理后，HeLa細(xì)胞與HeLa-C細(xì)胞的藥物抗性無顯著差異（p>0.05）。Annexin V/PI雙染色流式細(xì)胞術(shù)分析結(jié)果顯示：在順鉑或紫杉醇濃度為為2.0μg/mL、20.0μg/mL時(shí)，HeLa-M細(xì)胞凋亡率明顯低于HeLa細(xì)胞與HeLa-C細(xì)胞組(p<0.01)，當(dāng)順鉑或紫杉醇濃度為0.2μg/mL時(shí)，三種細(xì)胞凋亡率相比無明顯差別(p>0.05)。在上述三種濃度處理后，HeLa細(xì)胞和HeLa

4、-C細(xì)胞凋亡率無明顯差異（p>0.05）。高效液相色譜檢測細(xì)胞內(nèi)藥物濃度顯示：在順鉑或紫杉醇濃度為2.0μg/mL、20.0μg/mL時(shí)，HeLa-M細(xì)胞內(nèi)順鉑濃度明顯低于HeLa細(xì)胞與HeLa-C細(xì)胞組(p<0.01)，當(dāng)順鉑或紫杉醇濃度為0.2μg/mL時(shí)，三種細(xì)胞內(nèi)藥物濃度相比無明顯差別(p>0.05)。在上述三種濃度處理后，HeLa細(xì)胞和HeLa-C細(xì)胞內(nèi)藥物濃度無明顯差異（p>0.05）。Western Blot顯示：HeLa