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文檔簡介
1、背景和目的:
宮頸癌嚴重危害女性健康。細胞凋亡阻滯在宮頸癌發(fā)生發(fā)展過程中具有重要作用。因此,探討誘導(dǎo)宮頸癌細胞凋亡的方法對于宮頸癌的治療具有重要臨床意義。黃芪是一種常用的中藥,黃芪多糖(asragulus polysacharin,APS)是其主要活性成分。研究表明,APS對多種腫瘤細胞的生長具有抑制作用,但尚未見APS對宮頸癌Hela細胞凋亡作用的報道。本研究究旨在探討APS對宮頸癌Hela細胞凋亡的作用及相關(guān)機制,為APS
2、在宮頸癌治療中的臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。
方法:
1.提取APS并定量。
2.根據(jù)預(yù)實驗的結(jié)果,實驗組:200μg/mL的APS誘導(dǎo)48h的宮頸癌Hela細胞,對照組:不加藥的宮頸癌Hela細胞。
3.通過AnnexinⅤ-FITC/PI結(jié)合流式細胞術(shù)和脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標記法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick
3、 end labeling,TUNEL)染色方法檢測APS對宮頸癌Hela細胞凋亡的作用。
4.通過Western blotting方法觀察APS處理前后宮頸癌Hela細胞中Bcl-2、Bcl-XL、Bax、Smac和IAP-1等細胞凋亡相關(guān)基因蛋白水平表達的變化。
結(jié)果:
1.制備的APS水溶液的濃度為53.623mg/mL。
2.AnnexinⅤ-FITC/PI結(jié)合流式細胞術(shù)結(jié)果顯示:實驗組宮
4、頸癌Hela細胞的凋亡均數(shù)顯著高于對照組宮頸癌Hela細胞(P<0.01),對照組和實驗組宮頸癌Hela細胞凋亡百分比分別為:0.773%和28.278%。
3.TUNEL染色結(jié)果顯示:實驗組宮頸癌Hela細胞的凋亡率顯著高于對照組宮頸癌Hela細胞(P<0.01)。
4.Western blotting結(jié)果顯示:實驗組宮頸癌Hela細胞中Bcl-2和IAP-1蛋白水平的表達顯著低于對照組宮頸癌Hela細胞(P<0.
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