黃芪多糖對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞凋亡的作用.pdf

1、背景和目的：
　　宮頸癌嚴(yán)重危害女性健康。細(xì)胞凋亡阻滯在宮頸癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中具有重要作用。因此，探討誘導(dǎo)宮頸癌細(xì)胞凋亡的方法對(duì)于宮頸癌的治療具有重要臨床意義。黃芪是一種常用的中藥，黃芪多糖(asragulus polysacharin，APS)是其主要活性成分。研究表明，APS對(duì)多種腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)具有抑制作用，但尚未見(jiàn)APS對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞凋亡作用的報(bào)道。本研究究旨在探討APS對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞凋亡的作用及相關(guān)機(jī)制，為APS

2、在宮頸癌治療中的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　1.提取APS并定量。
　　2.根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，實(shí)驗(yàn)組:200μg/mL的APS誘導(dǎo)48h的宮頸癌Hela細(xì)胞，對(duì)照組:不加藥的宮頸癌Hela細(xì)胞。
　　3.通過(guò)AnnexinⅤ-FITC/PI結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)和脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick

3、 end labeling,TUNEL)染色方法檢測(cè)APS對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞凋亡的作用。
　　4.通過(guò)Western blotting方法觀察APS處理前后宮頸癌Hela細(xì)胞中Bcl-2、Bcl-XL、Bax、Smac和IAP-1等細(xì)胞凋亡相關(guān)基因蛋白水平表達(dá)的變化。
　　結(jié)果：
　　1.制備的APS水溶液的濃度為53.623mg/mL。
　　2.AnnexinⅤ-FITC/PI結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示:實(shí)驗(yàn)組宮

4、頸癌Hela細(xì)胞的凋亡均數(shù)顯著高于對(duì)照組宮頸癌Hela細(xì)胞(P＜0.01)，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組宮頸癌Hela細(xì)胞凋亡百分比分別為:0.773％和28.278％。
　　3.TUNEL染色結(jié)果顯示:實(shí)驗(yàn)組宮頸癌Hela細(xì)胞的凋亡率顯著高于對(duì)照組宮頸癌Hela細(xì)胞(P＜0.01)。
　　4.Western blotting結(jié)果顯示:實(shí)驗(yàn)組宮頸癌Hela細(xì)胞中Bcl-2和IAP-1蛋白水平的表達(dá)顯著低于對(duì)照組宮頸癌Hela細(xì)胞(P＜0.