化療藥物聯(lián)合光動力療法對人宮頸癌Hela細胞殺傷作用的研究.pdf

1、宮頸癌是女性常見的惡性腫瘤。在我國,由于患者自我保健意識的缺失和早期診斷方法普及難度大,很多患者治療時已經(jīng)到了晚期,同時近年呈現(xiàn)年齡趨于年輕化的特點。光動力療法(PDI)是近年來逐漸興起的一種有效、安全、副作用小、可協(xié)同性和重復性高,而且成本相對較小的一種淺表腫瘤治療方法,為部分宮頸癌及癌前病變患者提供了另外一種可選擇的治療手段。5-氨基酮戊酸(5-ALA)是第二代的光敏劑,克服了第一代光敏劑在體內(nèi)存留時間長的缺點,適合應用于宮頸癌的臨

2、床治療。但光毒作用限制了光敏劑的用量,使得光動力療法的效果受到限制。順鉑(cisplatin)是宮頸癌臨床上最常用的化療藥物。拓撲替康(topotecan)是一種廣譜的抗腫瘤藥物,和順鉑聯(lián)合應用已有實驗證實可以增強對癌細胞的細胞毒作用。但是由于腫瘤細胞耐藥性和毒副作用,化療藥物對宮頸癌的治療效果有待進一步提高。血紅素氧合酶(HO)是生物體內(nèi)催化血紅素分解的限速酶。近年來發(fā)現(xiàn)血紅素氧合酶-1(HO-1)與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關,并有研究證

3、明HO-1有抗凋亡的功能。
　　 本實驗旨在研究聯(lián)合應用化療藥物和光動力療法能否提高對宮頸癌Hela細胞的殺傷作用及其作用機理。
　　 目的:探討順鉑、拓撲替康聯(lián)合光動力治療對人宮頸癌細胞株Hela的殺傷作用及細胞凋亡的機理。
　　 方法:將人宮頸癌細胞株Hela細胞分為空白對照組(control)、單純光動力治療組(PDT組)、順鉑加拓撲替康組(DDP-TPT組)、順鉑加光動力治療組(DDP-PDT組)、拓撲替

4、康加光動力治療組(TPT-PDT組)以及順鉑和拓撲替康加光動力治療組(DDP-TPT-PDT組)。5-ALA的實驗濃度為1mmol/L,激光的強度為5J/cm2?？瞻捉M僅接受5J/cm2的激光照射,DDP組順鉑的劑量為10mg/L,TPT組拓撲替康的劑量0.4mg/L。DDP-TPT組,DDP-TPT-PDT組順鉑的劑量為5mg/L,拓撲替康的劑量為0.2mg/L。各組均避光孵育,力求其他實驗條件相同。噻唑藍MTT法檢測六組Had細胞的

5、增殖抑制情況。流式細胞儀(FCM)檢測PDT組、DDP-PDT組、TPT-PDT組和DDP-TPT-PDT組Hela細胞的凋亡情況。免疫細胞化學(ICC)法檢測PDT組、DDP-PDT組、TPT-PDT組和DDP-TPT-PDT組Hela細胞內(nèi)HO-1的表達情況。金氏法檢測單純化療組(DDP-TPT組)和光動力療法(PDT組)對Hela細胞的增殖抑制情況是否有協(xié)同效應。
　　 結果:PDT組、DDP-PDT組、TPT-PDT組以

6、及DDP-TPT-PDT組對Hela細胞均有明顯的增殖抑制作用和誘導凋亡作用;DDP-PDT組、TPT-PDT組和DDP-TPT-PDT組對Hela細胞的增殖抑制和Hela細胞凋亡的程度明顯強于PDT組;PDT組,DDP-PDT組,TPT-PDT組和DDP-TPT-PDT組均可顯著抑制Hela細胞中HO-1的表達,細胞中HO-1表達的下降趨勢也與處理組對Hela細胞的誘導凋亡趨勢相一致。PDT組和DDP-TPT組對Hela細胞的抑制作用