編碼鼠CD20腺病毒載體感染的樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)抗小鼠淋巴瘤免疫.pdf

1、第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文編碼鼠CD20腺病毒載體感染的樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)抗小鼠淋巴瘤免疫姓名：王友臣申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師：譚曉華20080501第三軍醫(yī)火學(xué)碩士學(xué)位論文mcD20／EGFP細(xì)胞作為靶細(xì)胞，免疫后小鼠脾細(xì)胞作為效應(yīng)細(xì)胞，用3個效靶比(E：T)100：1、50：1和25：l，用乳酸脫氫酶釋放實驗檢測CTL殺傷率。3體內(nèi)荷瘤實驗：取C57BL／6小鼠20只，4—6周(182)g，雌性，隨機分為兩組，實驗組(Ad5

2、／35mcD20感染Dcs免疫1次，10只)，對照組(dl70一3感染DCs免疫1次，10只)。具體免疫方法同細(xì)胞毒實驗。免疫1周后，以生理鹽水調(diào)整B16F10mCD2研EGFP細(xì)胞濃度為2105個／200“1，按每只小鼠2105B16FlOmCD20／EGFP細(xì)胞小鼠右后腿上部背側(cè)皮下接種。接種后前14天隔日觀察，14天后每日觀察小鼠成瘤情況，此時尚未成瘤的小鼠繼續(xù)觀察至兩個月。結(jié)果1用G418篩選及流式細(xì)胞儀分選技術(shù)相結(jié)合的方法可獲

3、得穩(wěn)定表達(dá)mcD20的B16F10mCD20／EGFP腫瘤細(xì)胞株，流式細(xì)胞儀檢測991％的細(xì)胞表達(dá)EGFP，997％表達(dá)mCD20。2體外細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞殺傷實驗：在效靶比為100：1、50：1和25：1情況下，實驗組的殺傷率分別為6383772％，(t=1533，PO01)、477053l％(t=1423，PO01)和2273311％(t=874，P001)，對照組的殺傷率分別為1537O80％、1283284％和11101Ol％。

4、實驗結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義。3荷瘤實驗：對照組小鼠在接種2105細(xì)胞的B16F10mCD20／EGFP細(xì)胞后16至18d內(nèi)全部有腫瘤生長，實驗組僅于18d(1只)、20d(2只)、24d(1只)共有4只小鼠成瘤，且腫瘤體積小于對照組。實驗組其余小鼠繼續(xù)觀察至2個月，仍未見腫瘤生長。對照組成瘤率為lOO％，實驗組為40％，兩組間成瘤率有顯著性差異(x2=857，PO01)。提示Ad5／35mCD20能產(chǎn)生抗小鼠淋巴瘤的特異性免疫，對cD20的淋