尿酸輔助樹突狀細胞誘導抗乙肝病毒免疫效應的實驗研究

1、華中科技大學博士學位論文尿酸輔助樹突狀細胞誘導抗乙肝病毒免疫效應的實驗研究姓名：馬曉軍申請學位級別：博士專業(yè)：內(nèi)科學（傳染病）指導教師：田德英20070429華中科技大學博士學位論文24DC體外負載HBsAg，聯(lián)合尿酸接種正常BALBc小鼠。尾靜脈注射方式接種，DC接種數(shù)量為1106每只小鼠，每周接種一次，共兩次。分高、中、低劑量（分別為400μg、200μg、100μg）尿酸聯(lián)合HBsAgDC組、負載或未負載HBsAg的DC單獨接種組

2、、尿酸單獨接種組（200μg）及PBS對照組。同時以負載HBS2839的DC單獨或聯(lián)合尿酸免疫小鼠，作為平行對照觀察組。一周和兩周時，以體內(nèi)熒光測定CTL活性方法，用流式細胞儀檢測特異性CTL活性；免疫兩周時，取小鼠脾T淋巴細胞，CFSE染色，體外以HBsAg或HBS2839刺激培養(yǎng)72h后，流式細胞儀測定其增殖反應；取小鼠脾淋巴細胞體外HBsAg或HBS2839刺激培養(yǎng)72h后，以ELISA法測定細胞上清IL4和IFN的分泌水平。結(jié)果

3、：1.通過鑒定體外成功誘導培養(yǎng)出DC。尿酸濃度為400μgml、200μgml、100μgml時能增強DC細胞表面CD83、CD86、IAIE分子表達率；提高IL12p70分泌水平（與陰性對照組相比，P＜0.05）；尿酸能增強DC刺激T細胞增殖能力（與陰性對照組相比，P值均小于0.05）；尿酸濃度為70μgml時，細胞表面分子表達、IL12p70分泌水平、刺激T細胞增殖作用與陰性對照組比較均無明顯差別（P＞0.05）。UA促進DC成熟的

4、能力呈尿酸劑量依賴性增強。2.RTPCR結(jié)果示尿酸組與培養(yǎng)基對照組相比，TLRsmRNA表達出現(xiàn)明顯的變化。TLR2mRNA、TLR3mRNA、TLR4mRNA表達下降（P＜0.05），以TLR4mRNA下降最明顯；IL12p70表達顯著增高（P＜0.05）；與LPS組相比，TLRsmRNA與IL12p70mRNA表達水平相似，無統(tǒng)計學差異，P＞0.05。3.（1）免疫印跡示，尿酸刺激后，15min時，pp38、pERK12、pJNK、