大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng)及其分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的: 本研究通過建立大鼠BMSCs體外分離、純化的培養(yǎng)方法，觀察G-CSF對BMSCs增殖的影響，并對G-CSF和GDNF在BMSCs神經(jīng)細(xì)胞分化中作用進(jìn)行探討。 方法: 1、無菌條件下采集2周齡SPF級SD大鼠的股骨和脛骨的骨髓細(xì)胞，使用含10％FBS的DMEM/F12培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)，從細(xì)胞貼壁性、免疫表型和脂肪分化三方面進(jìn)行BMSCs鑒定： 2、MTT法測定G-CSF對BMSCs增殖的影響；

2、 3、取P5細(xì)胞，10ng/ml bFGF進(jìn)行預(yù)誘導(dǎo)24h后，按GDNF和不同濃度的G-CSF組合分組(B1-5)進(jìn)行成神經(jīng)元細(xì)胞誘導(dǎo)，并從細(xì)胞形態(tài)變化、RT-PCR對GFR-α1mRN,A表達(dá)水平進(jìn)行檢測，鑒定誘導(dǎo)所得細(xì)胞； 4、統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)均用均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s)表示，采用SPSS13.0軟件處理，方法是單因素方差分析和g檢驗(yàn)法，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。。 結(jié)論: 1、差速貼壁法可以有效地分離純化BMSCs；