四種中藥復(fù)方水煎劑有效成分的含量測(cè)定及其對(duì)大鼠離體空腸平滑肌的作用研究.pdf

1、目的：本研究共分為兩個(gè)部分，第一部分旨在建立金鈴子散、芍藥甘草湯、痛瀉要方、柴郁湯四種中藥復(fù)方水煎液有效成分的含量測(cè)定方法，保證臨床用藥的安全和有效。金鈴子散以元胡中所含的生物堿延胡索乙素為質(zhì)量控制指標(biāo)；芍藥甘草湯和痛瀉要方以白芍中所含的芍藥苷為質(zhì)量控制指標(biāo)；柴郁湯以郁金中所含的脂溶性成分姜黃素為質(zhì)量控制指標(biāo)。分別篩選出延胡索乙素、芍藥苷、姜黃素在本實(shí)驗(yàn)中的最佳色譜分離、測(cè)定條件，并進(jìn)行嚴(yán)格的方法學(xué)考察，包括儀器系統(tǒng)的精密度試驗(yàn)、樣品重

2、復(fù)性試驗(yàn)，穩(wěn)定性試驗(yàn)，加樣回收率試驗(yàn)來(lái)保證試驗(yàn)方法的重現(xiàn)性、穩(wěn)定性、可靠性。在此基礎(chǔ)上本研究第二部分采用離體大鼠空腸平滑肌運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)，觀察痛瀉要方、芍藥甘草湯、柴郁湯對(duì)大鼠離體空腸平滑肌運(yùn)動(dòng)的影響，對(duì)三種中藥水煎液進(jìn)行藥效學(xué)初篩，并初步探討其作用機(jī)制。 方法：首先從化學(xué)成分角度出發(fā)，對(duì)金鈴子散、芍藥甘草湯、痛瀉要方、柴郁湯四種藥物水煎液所含有效成分進(jìn)行定量研究，采用反相高效液相色譜法，分別測(cè)定金鈴子散、芍藥甘草湯、痛瀉要方、柴郁湯

3、處方中主藥所含的有效化學(xué)成分的含量。本實(shí)驗(yàn)使用Kromasil C<,18>色譜柱(250 mm×4.6 mm，5μm)，分別測(cè)定金鈴子散水煎液中延胡索乙素的含量，芍藥甘草湯中芍藥苷的含量和痛瀉要方水煎液中芍藥苷的含量，柴郁湯水煎液中姜黃素的含量。延胡索乙素的含量測(cè)定色譜條件為以甲醇-0.1％磷酸溶液(用三乙胺調(diào)pH為6.0)(60：40)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為280 nm，流動(dòng)相流速為1.0 ml/min，柱溫為30℃。芍藥甘草湯中芍藥

4、苷的含量測(cè)定和痛瀉要方水煎液中芍藥苷的含量測(cè)定色譜條件為以甲醇-水(25：75)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230 nm，流動(dòng)相流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。柴郁湯水煎液中姜黃素的含量測(cè)定色譜條件為以甲醇-水(70：30)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為430 nm，流動(dòng)相流速為1.0 ml/min，柱溫為30℃。研究第二部分采用腸管懸掛法，以大鼠離體空腸收縮振幅和收縮頻率為觀察指標(biāo)，觀察幾種理氣開(kāi)郁中藥復(fù)方水煎劑及藥物血清對(duì)大鼠離體空腸平滑肌收

5、縮以及對(duì)不同激動(dòng)劑所致腸管痙攣的影響，并進(jìn)一步觀察藥物單體成分的藥效活性。最后將藥效學(xué)的篩選結(jié)果與物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制的研究綜合分析，探討三方面的關(guān)系，為四種復(fù)方的臨床應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 結(jié)論： 1.本研究所建立的反相高效液相色譜法測(cè)定金鈴子散水煎液中延胡索乙素、芍藥甘草湯中芍藥苷以及痛瀉要方水煎液中芍藥苷結(jié)果準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，靈敏度高，可用于金鈴子散、芍藥甘草湯和痛瀉要方三種復(fù)方中藥水煎劑的質(zhì)量控制。 2.痛瀉要