四種中藥復方水煎劑有效成分的含量測定及其對大鼠離體空腸平滑肌的作用研究.pdf

1、目的：本研究共分為兩個部分，第一部分旨在建立金鈴子散、芍藥甘草湯、痛瀉要方、柴郁湯四種中藥復方水煎液有效成分的含量測定方法，保證臨床用藥的安全和有效。金鈴子散以元胡中所含的生物堿延胡索乙素為質量控制指標；芍藥甘草湯和痛瀉要方以白芍中所含的芍藥苷為質量控制指標；柴郁湯以郁金中所含的脂溶性成分姜黃素為質量控制指標。分別篩選出延胡索乙素、芍藥苷、姜黃素在本實驗中的最佳色譜分離、測定條件，并進行嚴格的方法學考察，包括儀器系統(tǒng)的精密度試驗、樣品重

2、復性試驗，穩(wěn)定性試驗，加樣回收率試驗來保證試驗方法的重現(xiàn)性、穩(wěn)定性、可靠性。在此基礎上本研究第二部分采用離體大鼠空腸平滑肌運動實驗，觀察痛瀉要方、芍藥甘草湯、柴郁湯對大鼠離體空腸平滑肌運動的影響，對三種中藥水煎液進行藥效學初篩，并初步探討其作用機制。 方法：首先從化學成分角度出發(fā)，對金鈴子散、芍藥甘草湯、痛瀉要方、柴郁湯四種藥物水煎液所含有效成分進行定量研究，采用反相高效液相色譜法，分別測定金鈴子散、芍藥甘草湯、痛瀉要方、柴郁湯

3、處方中主藥所含的有效化學成分的含量。本實驗使用Kromasil C<,18>色譜柱(250 mm×4.6 mm，5μm)，分別測定金鈴子散水煎液中延胡索乙素的含量，芍藥甘草湯中芍藥苷的含量和痛瀉要方水煎液中芍藥苷的含量，柴郁湯水煎液中姜黃素的含量。延胡索乙素的含量測定色譜條件為以甲醇-0.1％磷酸溶液(用三乙胺調pH為6.0)(60：40)為流動相，檢測波長為280 nm，流動相流速為1.0 ml/min，柱溫為30℃。芍藥甘草湯中芍藥

4、苷的含量測定和痛瀉要方水煎液中芍藥苷的含量測定色譜條件為以甲醇-水(25：75)為流動相，檢測波長為230 nm，流動相流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。柴郁湯水煎液中姜黃素的含量測定色譜條件為以甲醇-水(70：30)為流動相，檢測波長為430 nm，流動相流速為1.0 ml/min，柱溫為30℃。研究第二部分采用腸管懸掛法，以大鼠離體空腸收縮振幅和收縮頻率為觀察指標，觀察幾種理氣開郁中藥復方水煎劑及藥物血清對大鼠離體空腸平滑肌收

5、縮以及對不同激動劑所致腸管痙攣的影響，并進一步觀察藥物單體成分的藥效活性。最后將藥效學的篩選結果與物質基礎和作用機制的研究綜合分析，探討三方面的關系，為四種復方的臨床應用提供了實驗依據(jù)。 結論： 1.本研究所建立的反相高效液相色譜法測定金鈴子散水煎液中延胡索乙素、芍藥甘草湯中芍藥苷以及痛瀉要方水煎液中芍藥苷結果準確、重現(xiàn)性好，靈敏度高，可用于金鈴子散、芍藥甘草湯和痛瀉要方三種復方中藥水煎劑的質量控制。 2.痛瀉要