線粒體DNA突變在感音神經(jīng)性聾發(fā)病中作用的研究.pdf

1、華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文線粒體DNA突變在感音神經(jīng)性聾發(fā)病中作用的研究姓名：王瓊申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：耳鼻咽喉科學(xué)指導(dǎo)教師：孔維佳2002.4.30華中種杖土學(xué)啊井區(qū)學(xué)院博士豐業(yè)語文實(shí)■一緣舢厭鼠內(nèi)耳組織微量核酸的提取及PCR擴(kuò)增、l／f一【I摘要l目的比較不同核酸分離純化方法在大鼠內(nèi)耳組織微量核酸分析中的應(yīng)用特點(diǎn)。方法分別用提質(zhì)粒法，SDS蛋白酶K法，TRIZOL法提取大鼠內(nèi)耳組織微量核酸，對所提核酸進(jìn)行紫外吸收光譜分析及

2、pCR擴(kuò)增。結(jié)果每單側(cè)內(nèi)耳組織提取的DNA量和純度(OD260／0D280)分別為：提質(zhì)粒法100～180ng，178～190，SDS氆￡自酶K法為400560rig，18毗00，TRIZOL法200400rig，175～I(xiàn)90。三種方法所提核酸均可成功的擴(kuò)增出線粒體DNA片段；除提質(zhì)粒法以外，其他方法所得的DNA均可擴(kuò)增出核DNA片段。TRIZOL法提取的RNA均可擴(kuò)增出8actin片段和COXIII片段。結(jié)論提質(zhì)粒法可制備不含核DN