肺血減少型先天性心臟病幼豬動物模型遠端肺血管發(fā)育與血清VEGF、bFGF、MMP-2表達關系的實驗研究.pdf

1、目的：采用一種新穎的Hybrid方法建立肺血減少型先心病幼豬動物模型，探討血清中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)表達水平與遠端肺血管發(fā)育的關系，探討肺血減少型先心病遠端肺血管發(fā)育的病理生理機制。
　　方法：采用生后1-2月的中華實驗小型幼豬，共20只。隨機分為三組。假手術組(S組n=6)：右進胸微創(chuàng)小切口制成一過性肺血減少；手術組1(T1組n=7)：右進胸微創(chuàng)小切口

2、，經(jīng)右心房表面送入自制球囊擴張器行人工房間隔造口+肺動脈Banding環(huán)縮，使跨環(huán)縮處壓差為20~30mmHg；手術組2(T2組n=7)：手術過程同 T1組，使跨環(huán)縮處壓差為≥30~50mmHg。三組均于術前、術后、術后一月、術后兩月取外周靜脈血2ml，用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測血清VEGF、bFGF、MMP-2含量；三組分別于開胸后、手術結束時、術后二月（開胸）取右肺中葉外側段大小約1.0×0.8×0.8cm3的肺組織，wei

3、ght彈性纖維+van Gieson染色，光鏡下觀察其病理形態(tài)學變化:肺細小動脈外徑（D2）、內(nèi)徑（D1）,平均中膜厚度百分比(mMTPA)，血管總面積(外彈力板以內(nèi))、血管腔面積(內(nèi)膜表面以內(nèi))、血管壁面積(外彈力板與內(nèi)膜表面之間)、血管壁面積/血管總面積(WA/TA)、血管腔面積/血管總面積(EA/TA)、單位面積肺細小動脈數(shù)目（APSC）。
　　結果：S組動物存活5只，T1組動物存活6只，T2組動物存活5只；術后兩月T1組血

4、清VEGF、bFGF、MMP-2含量較S組升高（p<0.05），T2組血清VEGF、bFGF、MMP-2含量較S組顯著升高（p<0.01），而血清VEGF、bFGF、MMP-2含量在S組手術前后沒有明顯變化（p>0.05）；T1組和T2組術后一月較術前升高（p<0.05），術后兩月顯著升高（p<0.01）；T1組、T2組在開胸后、手術結束時肺細小動脈內(nèi)徑與S組之間無顯著性差異（p>0.05），T1組術后二月時肺細小動脈內(nèi)徑高于S組（p<

5、0.05），T2組術后二月時肺細小動脈內(nèi)徑顯著高于S組（p<0.01）；T1組術后二月時肺APSC低于S組（p<0.05），T2組術后二月時肺APSC明顯低于 S組（p<0.01）；T1組術后兩月血清 bFGF水平與血清 VEGF水平呈正相關（r=0.966，p<0.01），與血清MMP-2水平呈正相關（r=0.972，p<0.01），與動脈血氧分壓呈負相關（r=-0.968，p<0.01），與mMTPA呈負相關（r=-0.920，p<

6、0.01），與EA/TA呈正相關（r=0.951，p<0.01）,與APSC呈負相關（r=-0.967，p<0.01）；S組術后兩月血清bFGF水平與上述指標無明顯相關性；T2組術后兩月血清bFGF水平與上述指標亦有顯著相關性。
　　結論：
　　1、本實驗成功地建立了肺血減少型先心病幼豬動物模型，肺血減少導致幼豬肺細小動脈形態(tài)發(fā)育異常。
　　2、肺組織缺血、缺氧等因素可刺激機體VEGF、bFGF、MMP-2表達上調(diào)。<