鱖病毒和嗜水氣單胞菌二聯(lián)疫苗研究.pdf

1、鱖(Sinipercachuastsi)是我國(guó)的淡水名貴魚(yú)類(lèi)，具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和出口創(chuàng)匯能力，但自1993年以來(lái)，鱖疾病流行，給鱖的養(yǎng)殖生產(chǎn)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。由于鱖的人工養(yǎng)殖歷史較短，并且以前的研究大多集中于鱖繁殖，飼養(yǎng)等方面，因此對(duì)鱖疾病一直沒(méi)有有效的防治措施。鱖病毒病(Sinipercachuastsivirusdisease)和嗜水氣單胞菌病(Aeromonashydrophiladisease)是危害鱖養(yǎng)殖業(yè)最主要的兩種疾病

2、，且這兩種疾病經(jīng)?；旌细腥?，因此研制能預(yù)防這兩種疾病的二聯(lián)疫苗必將會(huì)大大促進(jìn)鱖養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。本研究在檢測(cè)嗜水氣單胞菌GYK1株菌制成的全菌滅活疫苗和脂多糖亞單位疫苗以及大腸桿菌表達(dá)的鱖病毒主要衣殼蛋白疫苗免疫劑量和效果的基礎(chǔ)上，用嗜水氣單胞菌脂多糖和鱖病毒主要衣殼蛋白制成二聯(lián)疫苗，檢測(cè)了該二聯(lián)疫苗的免疫效果。 1.鱖嗜水氣單胞菌全菌疫苗和脂多糖疫苗免疫效果比較 用滅菌生理鹽水配制濃度為1.0×108cfu/ML、3.0×

3、108cfu/mL、6.0×108cfu/mL的嗜水氣單胞菌全菌滅活疫苗，以腹腔每尾注射0.2mL免疫鱖，用滅菌生理鹽水稀釋的嗜水氣單胞菌脂多糖按20μg/g、25μg/g和30μg/g魚(yú)體重劑量腹腔注射，同時(shí)對(duì)照組注射0.2mL生理鹽水，通過(guò)檢測(cè)試驗(yàn)鱖的抗體效價(jià)和免疫保護(hù)率研究了嗜水氣單胞菌全菌疫苗和脂多糖疫苗對(duì)鱖的免疫效果。結(jié)果嗜水氣單胞全菌滅活疫苗和脂多糖免疫鱖后免疫效價(jià)都可達(dá)到128，攻毒相對(duì)保護(hù)率也相近，25μg/g脂多糖對(duì)鱖

4、的相對(duì)保護(hù)率達(dá)到83.3％，3.0×108cfu/mL嗜水氣單胞菌免疫組鱖的相對(duì)保護(hù)率達(dá)到77.8％，說(shuō)明脂多糖的免疫效果較全菌疫苗略好。 2.鱖病毒MCP亞單位疫苗免疫效果 在預(yù)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，分別用鱖病毒主要衣殼蛋白按魚(yú)體重0.5μg/g、1.0μg/g、1.5μg/g和2.0μg/g劑量腹腔注射免疫鱖，通過(guò)檢測(cè)免疫鱖的血清抗體效價(jià)和相對(duì)免疫保護(hù)率來(lái)評(píng)價(jià)該疫苗的最佳免疫劑量和免疫效果。結(jié)果鱖病毒主要衣殼蛋白的最佳免疫劑

5、量為1.0μg/g，免疫鱖的血清抗體效價(jià)最高達(dá)到960，相對(duì)免疫保護(hù)率達(dá)到62.97％，而空白對(duì)照組的血清抗體效價(jià)只有30，說(shuō)明大腸桿菌表達(dá)的鱖病毒主要衣殼蛋白具有較好的免疫原性。 3.鱖病毒與嗜水氣單胞菌二聯(lián)疫苗對(duì)鱖的免疫效果 用脂多糖和鱖病毒主要衣殼蛋白制成二聯(lián)疫苗，以腹腔注射的方式免疫鱖后通過(guò)檢測(cè)免疫鱖的血清抗體效價(jià)、溶菌酶活性、超氧化物歧化酶活性、外周血淋巴細(xì)胞酸性α-醋酸萘酯酶陽(yáng)性率以及對(duì)病毒和細(xì)菌攻毒免疫保護(hù)

6、率的檢測(cè)，評(píng)價(jià)該二聯(lián)疫苗對(duì)鱖的免疫效果。結(jié)果二聯(lián)疫苗免疫鱖后誘導(dǎo)的抗體效價(jià)略低于單苗，免疫后第21d達(dá)到最高，然后開(kāi)始下降，抗鱖病毒和嗜水氣單胞菌的效價(jià)分別達(dá)到640和96；免疫后鱖的血清溶菌酶和超氧化物歧化酶含量分別達(dá)到54.44μg/mL和75.94U/mL，而空白對(duì)照組的只有20.27μg/mL和60.37U/mL；免疫后一周二聯(lián)疫苗免疫組鱖外周血淋巴細(xì)胞酸性α-醋酸萘酯酶陽(yáng)性率達(dá)到37.8％，而空白組只有16.4；免疫28d后分