嗜水氣單胞菌感染對團頭魴鐵代謝影響的初步研究.pdf

1、鐵是機體必要的微量元素之一，也是多數(shù)病原菌不可或缺的營養(yǎng)元素，兩者對鐵的共同需求形成了競爭關(guān)系。本實驗主要研究需鐵病原菌—嗜水氣單胞菌（Aeromonas hydrophila）感染引起的團頭魴（Megalobrama amblycephala）肝、脾、腎、腸等組織的病理變化和對鐵代謝及其調(diào)節(jié)的影響。實驗選取480尾健康的團頭魴幼魚，規(guī)格在30±5g，隨機分成兩組進行試驗。采用腹腔注射法，實驗組注射1×106 cfu/mL菌懸液0.1m

2、L，對照組注射體積等量的0.65％無菌生理鹽水，在感染后0h、4h、12h、24h、72h、120h等時間點采集組織樣本，檢測團頭魴肝、脾、腎、腸等組織的病理變化、機體鐵代謝水平以及與鐵代謝調(diào)節(jié)相關(guān)的基因表達的變化趨勢。研究結(jié)果如下:
　　1.嗜水氣單胞菌感染后團頭魴各組織的病理反應(yīng)在急性感染后4-12h，團頭魴的肝、脾、腎、腸等組織開始發(fā)生病變反應(yīng):肝細胞內(nèi)出現(xiàn)空泡，細胞腫大，細胞核腫脹且移至細胞邊緣，核仁不可見，胞漿內(nèi)有顆粒化

3、物質(zhì)。肝細胞索結(jié)構(gòu)模糊，排列紊亂，細胞界限不清晰，竇狀隙內(nèi)有淤血現(xiàn)象，靜脈有溢血，肝細胞間滲有大量的血細胞。相對于健康的脾臟，病變的脾臟細胞腫大，組織間伴有出血現(xiàn)象，組織細胞排列松散不整齊，結(jié)構(gòu)模糊，組織中出現(xiàn)空隙。腎臟組織中腎小管的病變程度不一，部分腎小管上皮細胞明顯腫大且結(jié)構(gòu)相對紊亂，部分細胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)有空泡，有解體趨勢。腎小球毛細血管擴張，嚴重的腎小球結(jié)構(gòu)模糊、松散，呈空泡狀，腎小囊內(nèi)存在大量空隙。腸道的粘膜下層和漿膜層增厚，結(jié)構(gòu)稀

4、疏水腫，出現(xiàn)大量紅細胞。肌纖維排列紊亂，有少量空泡散布其中，部分腸絨毛壞損，粘膜層上皮細胞脫落，杯狀細胞數(shù)量增多。
　　2.嗜水氣單胞菌感染對團頭魴鐵代謝的影響實驗組各個時間點團頭魴的血清鐵濃度相對于對照組均有不同程度的降低，呈現(xiàn)先降低后上升的趨勢，并在攻毒后12h、24h達到了顯著性水平(P＜0.05)。實驗組團頭魴的血清總鐵結(jié)合力相對于對照組有不同程度的增加，但均未達到顯著性水平。鐵染色結(jié)果顯示，實驗組肝臟鐵分布密度明顯高于對

5、照組;肝臟鐵定量結(jié)果顯示，實驗組肝臟中鐵含量高于對照組，但沒有達到顯著性水平(P＞0.05)。
　　3.嗜水氣單胞菌感染對團頭魴鐵代謝調(diào)節(jié)相關(guān)基因表達水平的影響肝臟hepc基因在感染后各時間點表達量相對于對照有明顯上調(diào)，均達到了顯著性水平(P＜0.05)，在感染后4h和12h達到了極顯著性水平(P＜0.01)。il-6基因在肝臟中的表達量增加，在4h和12h達到了顯著性水平(P＜0.05)，在感染后24 h達到了極顯著性水平(P＜

6、0.01)。JAK-STAT信號通路中的jak3基因的表達量上升，在4h、12h達到了顯著性水平(P＜0.05)，隨后有所下降;stat3基因表達量增加，并在4h、12h和24h達到了極顯著性水平(P＜0.01)，在72h達到了顯著性水平（P＜0.05）。BMP-SMAD信號通路的相關(guān)基因的相對表達量均有所上調(diào):bmp6基因表達量在4h和12h達到了極顯著性水平(P＜0.01)，24 h達到了顯著性水平(P＜0.05)，隨后下降至近感染