B淋巴細胞刺激因子治療性疫苗的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、 B淋巴細胞刺激因子（BLys)是1999年由瑞士和美國科學家發(fā)現(xiàn)的腫瘤壞死因子家族的一個新成員。該BLyS主要由T細胞和樹突狀細胞等髓系來源的細胞分泌。BLyS以膜結(jié)合以及可溶性兩種方式存在于機體中，兩者均具有生物學活性。本研究擬獲得一種BLyS治療性疫苗用于自身免疫性疾病的治療。由于直接使用BLyS分子可能會存在免疫原性弱或者由于其B細胞刺激活性而給自身免疫性疾病雪上加霜。為此，本文將BLyS的膜外受體結(jié)合區(qū)段(134-285

2、位殘基)與TT抗原肽融合后克隆入pKKH原核非融合表達載體，在大腸桿菌中進行了融合表達，表達的目的蛋白TT-BLyS為不溶性的包涵體。由于該蛋白質(zhì)的溶解性特別差，用劇烈的條件對包涵體進行了洗滌，洗滌后純度可達到80﹪以上。包涵體用7 M鹽酸胍溶解后進行凝膠過濾層析，可以獲得高純度的目的蛋白。純化產(chǎn)物分別免疫新西蘭兔、小鼠和大鼠，在動物體內(nèi)可以誘導出高滴度的抗體。體內(nèi)外實驗表明誘導的多克隆抗體可以中和天然BLyS的活性。當用于疾病模型研究

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