B淋巴細胞刺激因子對多發(fā)性骨髓瘤細胞株RPMI8226生長調(diào)控的研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學碩士學位論文B淋巴細胞刺激因子對多發(fā)性骨髓瘤細胞株RPMI8226生長調(diào)控的研究姓名：黃晨申請學位級別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學指導教師：高玉環(huán)20090301中文摘要2MTT法檢測BLys對RPMl8226細胞生長的影響21rHuBLyS對RPMl8226細胞的增殖實驗取對數(shù)生長期的RPMl8226細胞懸液，隨機分成陰性對照組、不同劑量BlyS組。陰性對照組加入1001tl細胞培養(yǎng)液，不同濃度的BlyS組終濃度分別為01、O5、1

2、0、30、509l／ml，每組3個平行孔。37℃、5％C02的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，分別于24、48、72小時之后，每孔加入5mg／mlMTT溶液209l，37。C孵育4h，然后離心培養(yǎng)板，小心吸去上清，每孔加入1509l二甲基亞砜(DMSO)，振蕩器充分振蕩后于酶標儀570nm處測各孔吸光度值。22BlyS拮抗硼替佐米作用的實驗取對數(shù)生長期的RPMl8226細胞懸液，隨機分成實驗組和對照組，對照組加入1001tl細胞培養(yǎng)液，實驗組第1組加入1

3、00tlBlyS溶液使終濃度達到2099／ml；第2組加入硼替佐米使終濃度達1099／ml；第3組加入BlyS溶液硼替佐米終濃度分別為20Irtg／ml、10tg／ml。每組3個平行孔，48小時后以上述同樣的MTT法測量各孔的光吸收值。3流式細胞術檢測BLys對RPMl8226細胞細胞凋亡的影響取對數(shù)生長期的RPMl8226細胞1105／ml，以不同濃度BLys處理48h后，收集細胞，用預冷4℃PBS洗三遍后，加入碘化丙碇(PI：50m