咬合垂直距離降低對大鼠咬肌影響的初步實驗研究.pdf

1、咬合因素在口頜系統(tǒng)疾病發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸中的作用一直是國內(nèi)外相關領域研究的重點，多數(shù)研究結(jié)果證實：咬合狀態(tài)的異常改變可以引起咀嚼肌及顳下頜關節(jié)（temporomandibular joint，TMJ）等口頜系統(tǒng)結(jié)構(gòu)的功能紊亂癥狀，甚至在超出機體適應能力的情況下引發(fā)病理性損傷。咬合垂直距離（occlusal vertical dimension,OVD）改變是導致咬合狀態(tài)異常變化的誘因之一，適合穩(wěn)定的咬合垂直距離是咀嚼肌充分發(fā)揮咀嚼效能及維

2、持顳下頜關節(jié)功能正常的重要保證，其異常改變會對咀嚼肌的結(jié)構(gòu)及功能發(fā)揮產(chǎn)生直接影響。咬?。╩asseter muscle）作為咀嚼肌群中最主要的升頜肌，其功能的發(fā)揮與咬合垂直距離直接相關，特殊的解剖部位決定了其與咬合垂直距離的密切關系，咬合垂直距離的穩(wěn)定性對于維持咬肌正常的組織結(jié)構(gòu)和功能具有重要意義。
　　國內(nèi)外已開展咬合垂直距離改變對口頜系統(tǒng)健康影響的相關方面研究，但研究熱點主要集中在如何正確評估及合理恢復OVD的臨床方法學研究,

3、以及升高OVD對咀嚼系統(tǒng)各部分影響的基礎及臨床實驗性研究，有關OVD降低對咀嚼系統(tǒng)組織結(jié)構(gòu)及功能影響的相關方面研究僅限于臨床觀察性及檢測性實驗，相關證據(jù)性基礎實驗研究鮮見報道。本研究試圖通過建立OVD降低大鼠動物模型，利用組織病理學、酶組織化學及生物化學檢測等技術對OVD降低后大鼠咬肌形態(tài)結(jié)構(gòu)、酶組織化學特性及能量代謝的相應反應展開綜合研究。
　　研究目的：建立OVD降低大鼠動物模型，利用相關實驗技術手段觀察分析大鼠咬肌的顯微形態(tài)

4、、超微結(jié)構(gòu)、酶組織化學特性及能量代謝變化規(guī)律，進行組間的橫向?qū)Ρ燃安煌瑫r間觀察點之間的縱向?qū)Ρ妊芯?，以期進一步了解OVD降低后咬肌結(jié)構(gòu)及功能的反應性及適應性變化，為相關臨床表現(xiàn)及臨床治療手段提供實驗性理論支持。
　　研究方法：
　　1.選用成年SD大鼠作為模型動物，采用人為機械性降低大鼠牙列段高度的方法誘導OVD降低，設置實驗組與操作對照組，根據(jù)實驗觀察節(jié)點各組再分為3天、10天、30天、60天四個亞組。
　　2.利用

5、冷凍切片及超薄切片技術制作咬肌組織標本，通過光學顯微鏡和透射電鏡（TEM）進行顯微形態(tài)及超微結(jié)構(gòu)的觀察分析。
　　3.利用酶組織化學技術對咬肌組織進行NADH-TR特殊酶染色，借助顯微圖像分析系統(tǒng)計算分析咬肌各型肌纖維的mCSA(平均橫截面積)及百分構(gòu)成比變化。
　　4.采用化學比色法，利用酶活性試劑盒測定咬肌組織內(nèi)Ca2+-ATPase、Na+-K+-ATPase活性值并行定量分析。
　　研究結(jié)果：
　　1.模

6、型特征出現(xiàn)迅速，可控性及穩(wěn)定性好，具備可重復性；實驗動物體重、生活習性、行為表現(xiàn)未受影響。
　　2.咬合垂直距離降低可以引起大鼠顯微及超微結(jié)構(gòu)的改變，其中以超微結(jié)構(gòu)的損傷性表現(xiàn)為主，線粒體的結(jié)構(gòu)性破壞為典型特征，OVD降低10天后，可觀察到明顯的空泡樣變性線粒體，伴有嵴斷裂、基質(zhì)密度降低；OVD降低30天后觀察到了典型的線粒體內(nèi)髓鞘樣變，盡管損傷程度較重，但僅局限于個別線粒體，范圍局限；至實驗第60天時，超微結(jié)構(gòu)已趨向正常表現(xiàn)，前

7、期的損傷性表現(xiàn)消失。
　　3.實驗60天組大鼠Ⅱa型肌纖維平均截面積（mCAS-2a）明顯小于實驗3天組和同期操作對照組（p﹤0.05）；實驗60天組Ⅱb型肌纖維平均截面積（mCAS-2b）明顯大于實驗3天組和同期操作對照組（p﹤0.05）；實驗60天組Ⅱb型肌纖維所占百分構(gòu)成比明顯高于實驗3天組與同期操作對照組（p﹤0.05）。說明咬肌發(fā)生了肌纖維橫截面積的適應性改建，并且存在不同類型肌纖維之間的類型轉(zhuǎn)換，但改建特征在實驗的后期

8、才具顯著性，說明改建的發(fā)生需要一定時間。
　　4.咬合垂直距離降低后大鼠咬肌組織的Ca2+-ATPase、Na+-K+-ATPase活性出現(xiàn)短時間內(nèi)的降低，實驗30天時下降明顯，至實驗第60天時酶活性又恢復至接近正常水平，與同期對照組相比差異無顯著性，以上結(jié)果說明OVD降低可以引起咬肌的能量供應不足，但隨著狀態(tài)持續(xù)時間的延長酶活性可以得到恢復。
　　結(jié)論：
　　咬合垂直距離降低可以導致大鼠咬肌局限性的超微結(jié)構(gòu)損傷及短時