偏側(cè)咀嚼對大鼠咬肌PGC-1α表達(dá)及細(xì)胞凋亡影響的研究.pdf

1、目的:了解偏側(cè)咀嚼致雙側(cè)咀嚼肌運(yùn)動改變后咬肌組織中PGC-1α表達(dá)、肌細(xì)胞凋亡的變化情況,并探究這兩者的相關(guān)性。進(jìn)一步探討咀嚼肌功能紊亂的病因機(jī)制,為臨床上偏側(cè)咀嚼所致的顳下頜關(guān)節(jié)紊亂病的治療提供新的靶點(diǎn)和治療思路。
　　 方法:36只8周齡雌性Wistar大鼠(購于山東大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心),體重250-300g,隨機(jī)分為對照組(每組3只)與實(shí)驗(yàn)組(每組6只),利用拔除左側(cè)上頜磨牙的方法建立偏側(cè)咀嚼動物模型。建立模型后2周、4周、

2、6周、8周分批處死,取雙側(cè)咬肌組織,對相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行檢測。應(yīng)用原子分光光度法檢測Ca2+含量;用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-timefluorescentquantitativePCR)法檢測組織中PGC-1αmRNA的相對表達(dá)量;用細(xì)胞凋亡-Hoechst染色試劑盒檢測細(xì)胞凋亡;制作超薄切片,透射電鏡下觀察細(xì)胞凋亡的超微結(jié)構(gòu)。比較實(shí)驗(yàn)組與對照組以及拔牙側(cè)和非拔牙側(cè)大鼠咬肌各項(xiàng)指標(biāo)之間的差別,并分析Ca2+和PGC-1α、細(xì)胞凋亡指數(shù)之

3、間的關(guān)系。
　　 結(jié)果:
　　 1)各組組織中Ca2+濃度的變化趨勢與前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致:各組的實(shí)驗(yàn)組拔牙側(cè)的咬肌組織內(nèi)Ca2+的含量明顯高于對照組(P＜0.05);4周、6周實(shí)驗(yàn)組非拔牙側(cè)咬肌組織內(nèi)Ca2+的含量明顯高于2周、8周實(shí)驗(yàn)組非拔牙側(cè)組;而且4周組的實(shí)驗(yàn)組拔牙側(cè)的咬肌組織內(nèi)Ca2+的含量明顯高于非拔牙側(cè)(P＜0.01)。
　　 2)PGC-1αmRNA的相對表達(dá)量:4周組較2周組表達(dá)量增加并達(dá)到最大,而

4、6、8周組表達(dá)量下降。2周、4周組對照組與實(shí)驗(yàn)組拔牙側(cè)、非拔牙側(cè);實(shí)驗(yàn)組拔牙側(cè)與非拔牙側(cè);對照組之間均有明顯差異(P＜0.05)。4周、6周,8周對照組無明顯差異(P＞0.05);2周、4周組拔牙側(cè),4周組與6周組拔牙側(cè)、非拔牙側(cè)之間均有明顯差異(P＜0.05)。而6周、8周組僅對照組與實(shí)驗(yàn)組非拔牙側(cè)有差異(P＜0.05)。
　　 3)透射電鏡觀察到處于細(xì)胞凋亡不同階段的超微結(jié)構(gòu)變化,包括:出現(xiàn)核固縮,細(xì)胞器緊縮,細(xì)胞質(zhì)空泡化等

5、。
　　 4)凋亡指數(shù)的變化:細(xì)胞凋亡指數(shù)在第4周有較明顯的變化,隨后在6周、8周呈現(xiàn)增加趨勢(非拔牙側(cè)增加最明顯),但增加趨勢沒有4周明顯。2周組拔牙側(cè)、非拔牙側(cè)細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯小于對照組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);4周組拔牙側(cè)、非拔牙側(cè)同2周組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),4周組各組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。6周組拔牙側(cè)、非拔牙側(cè)較對照組有顯著增加(P＜0.05)。8周組非拔牙側(cè)凋亡指數(shù)明顯增加,與拔牙側(cè)有