hTGF-β1對大鼠軟骨細(xì)胞及小鼠淋巴細(xì)胞生物學(xué)特性的影響.pdf

1、　　目的：
　　研究細(xì)胞因子hTGF-β1對小鼠的淋巴細(xì)胞生物學(xué)行為的影響，以及hTGF-β1基因修飾的大鼠軟骨細(xì)胞生物學(xué)功能的改變，初步探討其作用機(jī)制。為尋找理想的軟骨組織工程種子細(xì)胞、并開發(fā)新的異種移植排斥治療和預(yù)防方法奠定基礎(chǔ)。
　　方法：
　　將hTGF-β1細(xì)胞因子作用于小鼠淋巴細(xì)胞，利用熒光抗體標(biāo)記及Annexin V和7-AAD雙染色，結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)檢測對多克隆刺激劑作用下的淋巴細(xì)胞CD69及CD25表達(dá)

2、水平及Annexin V~+/7-AAD~-細(xì)胞比例，判斷T細(xì)胞的活化與凋亡水平；~3H-TdR同位素?fù)饺敕z測淋巴細(xì)胞的增殖情況。另一方面，利用優(yōu)化的電穿孔轉(zhuǎn)染技術(shù)將pEGFP-TGF-β1-N1表達(dá)載體導(dǎo)入大鼠原代培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞中，流式細(xì)胞儀檢測熒光表達(dá)率，熒光顯微鏡觀察熒光表達(dá)情況，同位素?fù)饺敕z測軟骨細(xì)胞生物學(xué)功能。
　　結(jié)果：
　　小同劑量hTGF-β1對于多克隆刺激劑作用的小鼠T細(xì)胞的活化較對照組均無明顯抑制作用