低劑量率γ射線照射對腫瘤細胞凋亡及殺傷機制的研究.pdf

1、該實驗旨在通過對放射性粒子照射后誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡的研究以探討殺傷腫瘤的機制及劑量和劑量率的關(guān)系,為臨床應(yīng)用放射性粒子組織間近距離治療腫瘤提供依據(jù).該研究選取了人宮頸癌細胞株作為研究對象.第一部分低劑量率γ射線(<'60>Co源)照射誘導(dǎo)Hela細胞凋亡的研究目的 通過觀察體外Hela細胞在低劑量率γ射線(<'60>Co源)照射下細胞凋亡的規(guī)律,探索低劑量率γ射線照射對腫瘤細胞凋亡的影響及其與劑量的關(guān)系,摸索有效劑量范圍,為更深入研究持續(xù)

2、極低劑量率γ射線照射對腫瘤的殺傷機制奠定基礎(chǔ).方法 用1Gy/min劑量率1、2、5、10、15Gy的<'60>Co源分別照射Hela細胞.(1)采用Annexin-PI雙染法,觀察細胞早期凋亡,并通過流式細胞儀觀察照射后細胞凋亡率:(2)激光共聚焦顯微鏡觀察凋亡細胞形態(tài);(3)DNA梯形條帶分析證實調(diào)亡存在;(4)克隆分析觀察細胞增殖能力的變化.結(jié)論 低劑量率照射可誘導(dǎo)Hela細胞凋亡,且凋亡率與照射劑量相關(guān),在5Gy時,調(diào)亡率最高達

3、72.57﹪±3﹪.第二部分持續(xù)極低劑量率γ射線照射(<'125>I粒子源)對腫瘤細胞殺傷機制的研究目的 通過觀察體外Hela細胞在持續(xù)極低劑量率γ射線照射下細胞凋亡和增殖的規(guī)律,及其與劑量和劑量率的關(guān)系,試圖揭示持續(xù)極低劑量率輻射下腫瘤細胞的死亡方式并初步探討其發(fā)生機制,為臨床"粒子"治療提供理論依據(jù).方法 在第一部分實驗基礎(chǔ)上摸索出低劑量率γ射線照射誘導(dǎo)Hela細胞凋亡的劑量范圍,并以此為選擇劑量和時間點的根據(jù);(1)采用6711型

4、<'125>I粒子源,參照英國GARY實驗室設(shè)計的粒子照射細胞專用研究系統(tǒng),使用一定的粒子排布軟件算出符合實驗要求的等劑量曲線及粒子排布方式.(2)使用AAPM經(jīng)驗公式計算出不同實驗組所需的照射時間.(3)分別以2.25Gy/h、3.75Gy/h、4.50 cGy/h的極低劑量率持續(xù)照射細胞I、2、5、10 Gy的累計劑量.觀察與檢測:(1)用熒光顯微鏡觀察凋亡細胞形態(tài);(2)使用β-半乳糖苷酶染色,觀察不同劑量和劑量率下的"衰老"細胞