低劑量率γ射線照射對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡及殺傷機(jī)制的研究.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)旨在通過對(duì)放射性粒子照射后誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的研究以探討殺傷腫瘤的機(jī)制及劑量和劑量率的關(guān)系,為臨床應(yīng)用放射性粒子組織間近距離治療腫瘤提供依據(jù).該研究選取了人宮頸癌細(xì)胞株作為研究對(duì)象.第一部分低劑量率γ射線(<'60>Co源)照射誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡的研究目的 通過觀察體外Hela細(xì)胞在低劑量率γ射線(<'60>Co源)照射下細(xì)胞凋亡的規(guī)律,探索低劑量率γ射線照射對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡的影響及其與劑量的關(guān)系,摸索有效劑量范圍,為更深入研究持續(xù)

2、極低劑量率γ射線照射對(duì)腫瘤的殺傷機(jī)制奠定基礎(chǔ).方法 用1Gy/min劑量率1、2、5、10、15Gy的<'60>Co源分別照射Hela細(xì)胞.(1)采用Annexin-PI雙染法,觀察細(xì)胞早期凋亡,并通過流式細(xì)胞儀觀察照射后細(xì)胞凋亡率:(2)激光共聚焦顯微鏡觀察凋亡細(xì)胞形態(tài);(3)DNA梯形條帶分析證實(shí)調(diào)亡存在;(4)克隆分析觀察細(xì)胞增殖能力的變化.結(jié)論 低劑量率照射可誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡,且凋亡率與照射劑量相關(guān),在5Gy時(shí),調(diào)亡率最高達(dá)

3、72.57﹪±3﹪.第二部分持續(xù)極低劑量率γ射線照射(<'125>I粒子源)對(duì)腫瘤細(xì)胞殺傷機(jī)制的研究目的 通過觀察體外Hela細(xì)胞在持續(xù)極低劑量率γ射線照射下細(xì)胞凋亡和增殖的規(guī)律,及其與劑量和劑量率的關(guān)系,試圖揭示持續(xù)極低劑量率輻射下腫瘤細(xì)胞的死亡方式并初步探討其發(fā)生機(jī)制,為臨床"粒子"治療提供理論依據(jù).方法 在第一部分實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上摸索出低劑量率γ射線照射誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡的劑量范圍,并以此為選擇劑量和時(shí)間點(diǎn)的根據(jù);(1)采用6711型

4、<'125>I粒子源,參照英國GARY實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的粒子照射細(xì)胞專用研究系統(tǒng),使用一定的粒子排布軟件算出符合實(shí)驗(yàn)要求的等劑量曲線及粒子排布方式.(2)使用AAPM經(jīng)驗(yàn)公式計(jì)算出不同實(shí)驗(yàn)組所需的照射時(shí)間.(3)分別以2.25Gy/h、3.75Gy/h、4.50 cGy/h的極低劑量率持續(xù)照射細(xì)胞I、2、5、10 Gy的累計(jì)劑量.觀察與檢測(cè):(1)用熒光顯微鏡觀察凋亡細(xì)胞形態(tài);(2)使用β-半乳糖苷酶染色,觀察不同劑量和劑量率下的"衰老"細(xì)胞