X射線心臟局部照射致心肌細胞凋亡的分子機制.pdf

1、目的：
　　利用X射線照射大鼠心臟，構建心臟輻射損傷動物模型，研究放射性心臟損傷（radiation-induced heart disease,RIHD）早期心肌細胞凋亡可能的分子機制。
　　方法：
　　48只健康雄性Sprague-Dawley大鼠，隨機分為假照射組（sham）、照射組（RIHD）。假照射組8只，不接受X射線照射，照射組大鼠心臟接受X射線20Gy單次劑量照射，然后分為12h、24 h、2d、4d、1

2、 w、2w等6個亞組，分別在照射后（12 h、24 h、2d、4d、1w、2w）取心臟標本，分離大鼠左心室心肌，應用 TUNNEL法檢測大鼠心肌細胞凋亡百分率；采用real-time PCR和western blotting實驗技術檢測1w組、2w組心肌組織B淋巴細胞瘤-2相關X蛋白（BCL-2 associated X protein, Bax）的mRNA和蛋白、細胞色素C（Cytochrome C, Cyt-C）及心肌細胞線粒體Cy

3、t-C的表達水平變化以及12h組、24h組、2d組、4d組、1w組心肌細胞線粒體Bax、BH3結構域凋亡誘導蛋白截斷體（Truncated-BH3 interacting domain death agonist,t-Bid）的表達變化。
　　結果：
　　1.一般情況：照射前與照射后一周相比，模型大鼠出現(xiàn)活動減少、行動緩慢現(xiàn)象，且體重顯著降低（P<0.05）。
　　2.心肌細胞凋亡情況:與假照射組相比，心肌細胞在X射線

4、照射后12 h至2 w內出現(xiàn)顯著凋亡（P<0.05），且在24h達到高峰。
　　3. real-time PCR結果：心肌組織在X射線照射后1w和2w，Bax的mRNA表達顯著增加（P<0.05）;與照射后2w組相比，1w組表達更加明顯。
　　4. western blotting結果：與假照射組相比，○1X射線照射后1w組、2w組心肌組織Bax、Cyt-C表達增加（P<0.05），而心肌線粒體Cyt-C表達明顯下降（P<0

5、.05）；○2線粒體Bax在X射線照射后12 h、24 h、2d、4d表達增加（P<0.05）；○3心肌細胞線粒體t-Bid在24 h、2d、4d表達顯著增加（P<0.05）。
　　結論：
　　1. X射線心臟局部照射引起放射性心臟損傷早期出現(xiàn)心肌細胞凋亡。
　　2.放射性心臟損傷早期心肌細胞凋亡的可能機制是線粒體介導促凋亡蛋白Ba x激活且發(fā)生轉位，與線粒體膜融合致Cyt-C釋放，啟動細胞凋亡程序。
　　3.