Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子在斑塊型和點(diǎn)滴型銀屑病中的差異表達(dá)及功能研究.pdf

1、第一部分:Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在斑塊型和點(diǎn)滴型銀屑病皮損中的差異表達(dá)
　　目的:了解尋常型銀屑病皮損中Foxp3+細(xì)胞的數(shù)量與皮損嚴(yán)重程度及疾病分型、分期間的關(guān)系。
　　方法:通過(guò)免疫組化單染或雙染技術(shù)對(duì)41例尋常型銀屑病患者和10例正常對(duì)照皮膚中Foxp3+細(xì)胞的數(shù)量及Foxp3+細(xì)胞占CD3+細(xì)胞的比例進(jìn)行檢測(cè)。采用PSI評(píng)分或PASI評(píng)分分別對(duì)活檢部位皮損的嚴(yán)重程度及疾病的嚴(yán)重程度進(jìn)行評(píng)估。
　　結(jié)果:銀屑病

2、皮損中Foxp3+細(xì)胞主要位于真皮乳頭層和網(wǎng)狀層上方,表皮內(nèi)較少,在皮損周邊外觀正常皮膚及正常對(duì)照皮膚中Foxp3+細(xì)胞較少或沒(méi)有。銀屑病皮損中Foxp3+細(xì)胞的數(shù)量與皮損的嚴(yán)重程度(PSI評(píng)分)呈正相關(guān)(p＜0.0001),斑塊型銀屑病皮損中Foxp3+細(xì)胞的數(shù)量高于點(diǎn)滴型,進(jìn)展期高于穩(wěn)定期,穩(wěn)定期高于消退期(p＜0.05)。Foxp3+細(xì)胞占CD3+細(xì)胞的比例在真皮乳頭層高于表皮層和真皮網(wǎng)狀層(p＜0.0001),且從皮損的中央到邊

3、界到周邊外觀正常皮膚逐漸減少。
　　結(jié)論:Foxp3+細(xì)胞在斑塊型和點(diǎn)滴型銀屑病皮損中的差異表達(dá)提示兩者可能代表銀屑病皮損免疫反應(yīng)過(guò)程中的不同階段。Foxp3+細(xì)胞在真皮乳頭層和皮損中央的高表達(dá)可能參與了銀屑病皮損發(fā)生和維持。
　　第二部分:Treg與Th17細(xì)胞在斑塊型和點(diǎn)滴型銀屑病外周血中的差異表達(dá)
　　目的:了解尋常型銀屑病患者外周血Treg與Th17細(xì)胞的水平與疾病分型間的關(guān)系。
　　方法:通過(guò)流式細(xì)胞學(xué)

4、方法檢測(cè)17例尋常型銀屑病患者和12例正常對(duì)照外周血Foxp3+CD4+Treg細(xì)胞和IL-17+CD4+Th17細(xì)胞占CD4+細(xì)胞的比例。根據(jù)CD25和CD45RA的表達(dá)及CD25表達(dá)強(qiáng)弱的不同,分析了11例斑塊型銀屑病和10例正常對(duì)照aTreg、rTreg、non-Treg細(xì)胞的比例及CD4+CD25+T細(xì)胞中CD4+CD25high、CD4+CD25mid、CD4+CD25low細(xì)胞的比例。
　　結(jié)果:尋常型銀屑病患者外周血

5、Foxp3+CD4+Treg細(xì)胞的水平與疾病嚴(yán)重程度(PASI評(píng)分)正相關(guān)(p＜0.05)。斑塊型銀屑病患者外周血Foxp3+CD4+Treg細(xì)胞的水平高于點(diǎn)滴型(p＜0.0001);而IL-17+CD4+Th17細(xì)胞的水平低于點(diǎn)滴型(p＜0.0001)。斑塊型銀屑病患者CD4+CD25highTreg和aTreg細(xì)胞的比例顯著高于正常人(p＜0.001,p＜0.0001),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。斑塊型銀屑病患者CD4+CD25+T細(xì)胞的比

6、例高于正常人(p＜0.05);但rTreg、non-Treg及CD4+CD25mid、CD4+CD25low細(xì)胞的比例在斑塊型銀屑病和正常人間無(wú)顯著差異。
　　結(jié)論:Treg與Th17細(xì)胞間的失衡在斑塊型和點(diǎn)滴型銀屑病發(fā)病中起重要作用。
　　第三部分:Treg細(xì)胞對(duì)炎癥細(xì)胞因子的抑制功能在斑塊型和點(diǎn)滴型銀屑病間的差異
　　目的:了解尋常型銀屑病患者TGF-β-Foxp3+iTreg細(xì)胞對(duì)CD4+CD25-T細(xì)胞產(chǎn)生炎癥

7、細(xì)胞因子的抑制功能和血清中炎癥細(xì)胞因子的含量與疾病分型間的關(guān)系。
　　方法:將CD4+CD25-T細(xì)胞在有或無(wú)TGF-β刺激下培養(yǎng)5天,通過(guò)流式細(xì)胞學(xué)方法檢測(cè)TGF-β刺激后CD4+CD25-T細(xì)胞中CD25+Foxp3+細(xì)胞的比例,培養(yǎng)上清和血清中炎癥細(xì)胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-17的含量通過(guò)ELISA方法檢測(cè)。
　　結(jié)果:斑塊型銀屑病患者CD4+CD25-T細(xì)胞受TGF-β刺激后CD25+Foxp3+

8、細(xì)胞的比例顯著高于點(diǎn)滴型銀屑病和正常對(duì)照(p＜0.0001),點(diǎn)滴型銀屑病高于正常對(duì)照(p＜0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。斑塊型銀屑病患者CD4+CD25-T細(xì)胞受TGF-β刺激后產(chǎn)生更多的TNF-α;點(diǎn)滴型銀屑病患者則產(chǎn)生更多的IL-6和IL-1β;但正常人CD4+CD25-T細(xì)胞受TGF-β刺激后TNF-α、IL-6和IL-1β的產(chǎn)生均降低。點(diǎn)滴型銀屑病患者血清中IL-17和IL-6水平高于斑塊型,但TNF-α水平低于斑塊型。