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文檔簡介
1、p, p’-DDT,又稱二氯二苯三氯乙烷,是首個被廣泛使用的有機氯農(nóng)藥。DDT在上世紀曾經(jīng)被大量用于農(nóng)業(yè)和治療瘧疾傷寒等傳染病。后來人們發(fā)現(xiàn)其具有持久性和環(huán)境毒性,因此各國逐漸禁止生產(chǎn)和使用DD T。DD T作為一種持久性有機污染物,能通過直接接觸和食物鏈暴露于人體,對人類健康產(chǎn)生危害。大腸癌作為常見的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢。大腸癌的發(fā)生發(fā)展被認為是遺傳、環(huán)境、飲食和生活方式等多種因素共同作用的結(jié)果。近年來流行病學調(diào)查
2、發(fā)現(xiàn), D DT與大腸癌的發(fā)展有相關(guān)性,但兩者間的具體作用機制并不清楚。本研究主要探討 p, p’-DDT對大腸癌發(fā)展的影響及其作用機制。研究內(nèi)容包括以下幾個部分:
第一部分:在體外,通過MTT實驗,檢測p, p’-DDT對大腸癌細胞DLD1細胞存活的影響;Western印跡及 RNA干擾技術(shù)檢測 p, p’-DDT對細胞增殖相關(guān)的Wnt/β-catenin信號通路關(guān)鍵蛋白及其下游靶基因的影響;通過檢測ROS水平及SOD活性確
3、定 p, p’-DDT對 DLD1細胞內(nèi)氧化應激水平的影響。結(jié)果表明,在體外,p, p’-DDT通過氧化應激介導Wnt/β-catenin信號通路激活和下游靶基因c-Myc和cyclin D1過表達從而促進大腸癌D L D1細胞增殖。
第二部分:在體內(nèi),通過裸鼠成瘤模型檢測p, p’-DDT對裸鼠大腸癌腫瘤生長的影響;免疫組化及 western印跡實驗檢測腫瘤組織內(nèi) Wnt/β-catenin信號通路關(guān)鍵蛋白和Ki-67表達變
4、化;通過檢測SOD活性和GSH含量確定腫瘤組織內(nèi)氧化應激水平的變化。結(jié)果表明,在體內(nèi),p, p’-DDT也通過氧化應激水平介導Wnt/β-catenin信號通路激活從而促進大腸癌腫瘤的生長。
第三部分:通過細胞聚集實驗和結(jié)晶紫染色實驗檢測 p, p’-DDT對大腸癌細胞DLD1細胞與細胞間和細胞與基質(zhì)間粘附的影響;熒光定量PCR和 western印跡實驗檢測相關(guān)粘附因子E-cadherin和CD29的表達變化。結(jié)果表明,p,
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