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文檔簡(jiǎn)介
1、方法:以攜帶FOXQ1-shRNA的慢病毒載體感染SW480細(xì)胞,將細(xì)胞株分為FOXQ1-shRNA和NC-shRNA組,利用臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系926細(xì)胞行體外血管形成實(shí)驗(yàn),熒光顯微鏡觀察兩組細(xì)胞血管形成能力的差異,MTT、倍增時(shí)間、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)兩組組細(xì)胞的存活率,qRT-PCR、Western blot檢測(cè)VEGF-A、MMP2、cyclinD1的mRNA和蛋白水平的表達(dá)差異。利用重組 Shh蛋白誘導(dǎo)上述兩組細(xì)胞,觀察誘導(dǎo)前后細(xì)
2、胞存活率及血管形成能力的變化,檢測(cè)上述分子的表達(dá)差異。
結(jié)果:與 NC-shRNA組細(xì)胞相比,F(xiàn)OXQ1-shRNA組細(xì)胞的體外血管形成能力降低,而存活率無(wú)明顯變化,qRT-PCR及 Western blot顯示FOXQ1基因沉默后VEGF-A、MMP2的表達(dá)下調(diào),cyclinD1表達(dá)無(wú)差異。與NC-shRNA組比較,重組Shh蛋白誘導(dǎo)的FOXQ1-shRNA體外血管形成能力更低,存活率無(wú)明顯差異。
結(jié)論:FOXQ1
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