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文檔簡介
1、本文以玉米蛋白粉為原料,研究了葉黃素的高效液相(HPLC)定量方法、優(yōu)化了玉米蛋白粉中葉黃素的提取及皂化工藝參數,并利用高速逆流色譜進行了葉黃素純化的初步研究。得到具體結論如下: (1)以乙腈和乙酸乙酯組成的流動相系統進行梯度洗脫,在填充料顆粒直徑為5μm的分析型Ci8硅膠柱上較好的實現了葉黃素和其他類胡蘿卜素的分離,紫外檢測波長為447nm,柱溫26℃。利用外標法制作標準曲線,當葉黃素質量濃度為13.92~174.00μg/m
2、L時,有回歸方程Y=0.0622X-0.0294,R2=0.9995。該方法精密度為0.68%,平均回收率為97.61%。 (2)通過單因素和正交試驗,確定了優(yōu)化的葉黃素提取工藝參數為:提取溶劑95%(質量分數)的乙醇,液固比5mL/g,提取時間0.5h,提取溫度25℃,該工藝1次和2次提取的粗提取率分別為67.63%和69.68%;對試驗選取的玉米蛋白粉,皂化能顯著提高葉黃素質量濃度,提高率為37.74%,優(yōu)化的皂化工藝為:溫
3、度25℃,時間3h,KOH濃度5%(m/v),該工藝的葉黃素得率為45.67%(1次提取)。 (3)利用HPLC方法對葉黃素在3種溶劑系統中的分配系數進行測定,并選擇正己烷/乙醇/水(6∶5∶1.3)為葉黃素純化的溶劑系統;在流動相流速為1.2mL/min,轉速為800r/min的條件下進行高速逆流色譜(HSCCC)純化,收集產物經HPLC檢測,葉黃素純度最高可達91.57%,因此HSCCC是一種分離制備高純度葉黃素的有效方法。
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