血漿中的MicroRNA在肝損傷性疾病檢測(cè)中的應(yīng)用.pdf

1、肝臟是人體內(nèi)最大的實(shí)質(zhì)器官結(jié)構(gòu)，功能復(fù)雜，易受多種病原體、毒物及免疫病理累及，肝臟疾病成為人類發(fā)病和死亡的常見原因之一。已知多種致病原因可導(dǎo)致肝損傷，如病毒性肝炎、酒精性肝炎和藥物性肝炎等。各種有害因素所致的肝損傷可表現(xiàn)為肝壞死、脂肪肝、膽汁郁積、肝纖維化、肝硬化及肝癌等。對(duì)肝損傷的防治目前仍是一個(gè)全球性的嚴(yán)峻課題。
　　 實(shí)驗(yàn)室診斷水平對(duì)于肝臟疾病的預(yù)防、診斷和治療具有不可替代的關(guān)鍵作用。高靈敏度、高通量的快速篩查技術(shù)，有利于

2、及時(shí)發(fā)現(xiàn)傳染源、切斷傳播途徑，促進(jìn)預(yù)防和控制蔓延。廣泛的研究主要集中在尋找診斷肝損傷更加有效的外周血中的分子標(biāo)記物上，但是臨床實(shí)踐方面似乎進(jìn)展不大。血漿中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)是目前為止作為肝臟損傷診斷指標(biāo)應(yīng)用最多的分子標(biāo)記物。我們知道，血清AST水平在很多臨床疾病中都有升高，與之相比，ALT水平的升高經(jīng)常被認(rèn)為是肝細(xì)胞壞死的特異性診斷指標(biāo)。但是，隨著對(duì)疾病的認(rèn)識(shí)及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)水平的提高，我們逐漸認(rèn)識(shí)到ALT不應(yīng)該被

3、認(rèn)為是一種肝臟特異性的生物標(biāo)記物。因?yàn)樵谄渌麠l件下，血清中的ALT也會(huì)有升高，主要發(fā)生在骨骼肌損傷、甲狀腺機(jī)能減退以及肌炎等疾病。這些原因使得基于ALT水平的肝臟相關(guān)疾病的鑒別診斷變得有些困難。另外，在臨床應(yīng)用中，ALT水平通常與肝臟組織病理學(xué)變化相關(guān)性不好。所以，很多研究聚焦于尋找一個(gè)更加特異和可靠的分子生物標(biāo)記物作為ALT的補(bǔ)充或替代進(jìn)行肝臟損傷疾病的診斷。然而目前還沒有找到一種比ALT或AST更合適的生物標(biāo)記物。
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4、icroRNAs(miRNAs)是大小約21-23個(gè)堿基的非編碼單鏈小分子RNA，通過(guò)與靶基因3'端非翻譯區(qū)(3'-UTR)的不完全堿基配對(duì)發(fā)揮基因調(diào)控作用，使mRNA降解或抑制靶mRNA翻譯。miRNAs廣泛參與了生物體多種生理和病理過(guò)程，包括細(xì)胞增殖、凋亡、應(yīng)激反應(yīng)和腫瘤生成等等。通過(guò)表達(dá)量的上調(diào)或者下調(diào)影響細(xì)胞發(fā)育和疾病進(jìn)程。一些miRNAs在細(xì)胞或組織中特異性表達(dá)，所以組織型中miRNAs的表達(dá)量變化可能與某些疾病類型相關(guān)。有關(guān)

5、miRNAs的研究主要集中在腫瘤方面，認(rèn)為組織特異性miRNAs是一種新的與腫瘤分型和預(yù)測(cè)相關(guān)的分子。
　　 最近有報(bào)道指出外周血循環(huán)中的miRNAs可以被用作診斷腫瘤的非侵襲性生物標(biāo)記物。miRNAs在血漿和血清中非常穩(wěn)定，不受RNA裂解酶(RNases)影響，在長(zhǎng)期儲(chǔ)存或反復(fù)凍融等情況下仍能保持穩(wěn)定，健康人的血漿和血清當(dāng)中，miRNAs表達(dá)量相對(duì)很穩(wěn)定。這些特點(diǎn)表明可以開發(fā)血循環(huán)中腫瘤來(lái)源的miRNAs作為生物標(biāo)記物。隨著檢

6、測(cè)技術(shù)方法不斷進(jìn)步，循環(huán)miRNAs的應(yīng)用研究有了實(shí)質(zhì)性進(jìn)展，在腫瘤診斷和預(yù)后、產(chǎn)前診斷等領(lǐng)域都取得了一些重要成果。
　　 我們的研究主要集中在血漿中的miRNAs是否也可以被特異性的用作診斷肝臟損傷性疾病。在此項(xiàng)研究中，共有103名慢性乙肝患者和15名肌肉損傷患者的外周血作為研究樣本。這些患者和健康對(duì)照者血漿當(dāng)中的miRNAs表達(dá)譜使用Real-timePCR方法檢測(cè)。另外，我們也建立了兩種小鼠肝損傷模型(藥物性肝損傷和酒精性