PPAR-γ2基因多態(tài)性與糖尿病視網膜病變相關性的研究.pdf

1、目的:
　　 糖尿病視網膜病變(diabeticretinopathy，DR)是糖尿病最常見及最嚴重的微血管并發(fā)癥之一，已成為具有勞動能力的人群中首位的致盲性眼病。DR的發(fā)病機制尚未闡明，已證實是多種因素協(xié)同作用的結果。研究顯示28.8％的2型糖尿病(Type2diabetesmellitus，T2DM)患者早期即可發(fā)生視網膜病變，但仍有22.2％的T2DM患者雖然血糖水平控制不佳，但無視網膜病變發(fā)生。大量數據表明遺傳因素可能是

2、DR的始動因素。近年來，隨著分子生物學的發(fā)展，眾多學者致力于尋找DR的易感基因，過氧化物酶體增殖體激活受體-γ(peroxisomeproliferator-activatedreceptor-γ，PPAR-γ)基因是眾多候選基因中的一個。本研究經Meta分析發(fā)現(xiàn)在白種人中PPARγ基因與T2DM患者DR的發(fā)生顯著相關，但在亞洲T2DM患者中該相關性不明顯。在此基礎上本研究觀察了PPARγ基因的單核苷酸多態(tài)性(SNP，rs1801282

3、、rs3856806、rs12497191)的等位基因、基因型在中國T2DM人群中的分布頻率，探討PPARγ基因與中國T2DM人群DR的相關性，為DR的早期診斷、早期預防以及基因治療提供理論依據。
　　 方法:
　　 1.meta分析:在PubMed，美國科技信息所(ISIWebofKnowledge)，荷蘭醫(yī)學文摘數據庫(Embase)和中國知識資源總庫(CNKI)檢索相關文獻并根據納入和排除標準篩選、評價納入研究的質

4、量，提取有效數據，計算基因型分布的比值比(OR)及95％可信區(qū)間(CIs)，并探討異質性和偏倚，分析PPAR-γ基因與T2DM患者DR發(fā)生的相關性。2.病例對照研究:選取T2DM患者792例，均為中國人，其中病例組設為DR患者，共455例，根據早期糖尿病視網膜病變治療研究分類標準(EarlyTreatmentDiabeticRetinopathyStudy，ETDRS)分為兩個亞組:增殖性糖尿病視網膜病變(Proliferativedi

5、abeticretinopathy，PDR)227例和非增殖性糖尿病視網膜病變(Non-proliferativediabeticretinopathy，NPDR)228例，對照組為年齡、性別匹配的無視網膜病變的T2DM患者337例。抽提受試者外周血中基因組DNA，經PCR-連接酶反應(PCR-LDR)檢測分析PPARγ基因(rs1801282、rs3856806、rs12497191)多態(tài)性。SPSS13.0統(tǒng)計軟件包進行樣本基本特征

6、檢驗及Logistic回歸分析;用SHEsis軟件進行Hardy-Weinberg平衡檢驗觀察各組是否來自同一孟德爾群體，比較各組間等位基因和基因型頻率分布差異，分析等位基因和基因型與T2DM患者DR發(fā)生的相關性，對基因型進行連鎖分析及單倍型構建，進一步分析PPARγ基因多態(tài)性與T2DM患者DR發(fā)生的相關性。一般臨床資料中連續(xù)性資料均采用(x)±s表示，連續(xù)性變量采用t檢驗、分類數據采用x2檢驗，所有統(tǒng)計分析均為雙側檢驗，以P＜0.05

7、為差異有顯著性。
　　 結果:
　　 1.Meta分析結果顯示PPARγ基因SNPrs1801282與T2DM患者DR的發(fā)生相關。攜帶Ala基因型可降低T2DM患者DR的發(fā)生率(OR=0.81;95％CI:0.68-0.98，P=0.03)敏感性分析同樣表明Pro12Ala基因多態(tài)性與DR的發(fā)生相關(OR=0.75;95％CI:0.62-0.91，P=0.003)。
　　 2.病例對照研究結果:
　　 (

8、1)基因型分析結果:
　　 ①rs1801282:DR組:基因型分布為CC占89.1％，CG10.7％，GG0.2％;等位基因分布頻率為C94.4％，G5.6％。Hardy-Weinberg平衡定律檢驗x2=0.122，P=0.458。
　　 對照組:基因型分布為CC占92.2％，CG7.8％，GG0;等位基因分布頻率為C96.1％，G3.9％。Hardy-Weinberg平衡定律檢驗x2=0.551，P=0.727;<

9、br>　　 ②rs3856806
　　 DR組:基因型分布為CC占62.2％，CT34.7％，TT3.1％;等位基因分布頻率為C79.6％，G20.4％。Hardy-Weinberg平衡定律檢驗x2=1.94，P=0.16。
　　 對照組:基因型分布為CC占69.0％，CT27.4％，TT3.6％;等位基因分布頻率為C82.7％，T17.3％。Hardy-Weinberg平衡定律檢驗x2=0.612，P=0.434。<

10、br>　　 ③rs12497191
　　 DR組:基因型分布為AA占50.4％，AG42.9％，GG6.7％;等位基因分布頻率為A71.9％，G28.1％。Hardy-Weinberg平衡定律檢驗x2=1.68，P=0.194
　　 對照組:基因型分布為AA占49.4％，AG42.4％，GG8.2％;等位基因分布頻率為A70.6％，G29.4％。Hardy-Weinberg平衡定律檢驗x2=0.161，P=0.688。

11、
　　 PPAR-γ基因SNPrs1801282、rs3856806、rs12497191基因型頻率在DR組和對照組、PDR組和對照組、NPDR組和對照組間差異均無顯著性(P＞0.05)，以年齡、體質指數(BodyMassIndex，BMI)水平分層分析后也未觀察到顯著性差異。對全部樣本進行多因素Logistic回歸分析表明，糖化血紅蛋白(HbAlc)水平可能是T2DM患者DR發(fā)生的危險因素。C等位基因(SNPrs1801282

12、)攜帶者空腹血糖、糖化血紅蛋白(glycosylatedhemoglobin，HbAlc)水平顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義，即rs1801282位點與T2DM患者空腹血糖、HbAlc水平具有相關性。
　　 (2).單倍型分析結果:
　　 PPAR-γ基因3個SNP位點間存在顯著連鎖不平衡，但由于rs1801282位點GG基因型頻率＜0.3，故僅對rs3856806和rs12497191進行單倍型分析，未發(fā)現(xiàn)陽性結果。