EPO和TCF7L2基因多態(tài)性與糖尿病視網膜病變的相關性研究.pdf

1、研究背景：
　　糖尿病是由于人體內胰島素缺乏或相對缺乏所致的一種慢性內分泌代謝性疾病，患病人數(shù)逐年增加，到2030年世界范圍內預計達到4.38億，40％的糖尿病患者會進展為糖尿病視網膜病變(diabetic retinopathy，DR)。DR是糖尿病患者最常見的微血管并發(fā)癥之一，是成年人最常見的致盲性眼病。大量研究顯示多種因素通過多種途徑參與DR的發(fā)病過程，其中，遺傳因素在DR發(fā)病中起到重要作用。已發(fā)現(xiàn)促紅細胞生成素(eryth

2、ropoietin，EPO)和轉錄因子7類似物2（trans cription factor7like2，TCF7L2）基因單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)與高加索人群DR發(fā)病有明顯的相關性。EPO是一種促進紅細胞生成的糖蛋白，在DR發(fā)病過程中發(fā)揮雙重的作用:在DR早期，EPO呈高表達，保護視神經，防止視網膜細胞的死亡，保護血視網膜屏障;DR晚期，EPO增強血管內皮生長因子(vasc

3、ular endothelial growth factor,VEGF)的作用，促進視網膜新生血管形成，形成增殖性糖尿病視網膜病變(proliferative diabetic retinopathy,PDR)。TCF7L2是一種高度變異的轉錄因予，在調控胰島β細胞分泌胰島素、胰島素抵抗、維持血糖穩(wěn)態(tài)和Wnt信號途徑中發(fā)揮重要作用。研究證實胰島素抵抗的患者比胰島素敏感的患者更易發(fā)生DR。Wnt信號通路在調控增殖性視網膜病變的病理性血管形

4、成過程中發(fā)揮重要作用。木研究針對EPO和TCF7L2基因多態(tài)性與2型糖尿病(type2 diabetes mellitus，T2DM)患者的DR發(fā)病的相關性做了一些工作。
　　研究目的：
　　觀察EPO基因多態(tài)性（rs1617640，rs507392和rs551238）和TCF7L2基因多態(tài)性(rsl1196205)與T2DM患者的DR疾病易感性的相關性，探討基因多態(tài)性在T2DM患者的DR發(fā)病過程中的作用。
　　研究方

5、法：
　　本研究為病例對照研究，包含792例T2DM患者，其中病例組設為DR患者，共448例，其中PDR患者220例，非增殖性糖尿病視網膜病變(non-proliferativediabeticretinopathy,NPDR)患者228例，對照組設為無視網膜病變(diabeteswithnoretinopathy,DNR)T2DM患者，共344例。抽提所有T2DM患者基因組DNA，采用聚合酶鏈式反應-連接酶檢測反應(polyme

6、rasechainreaction-ligasedetectionreaction，PCR-LDR)技術，對EPO基因多態(tài)性(rs1617640，rs507392和rs551238)和TCF7L2基因多態(tài)性(rsl1196205)進行分型。應用t檢驗和x2檢驗對各組患者的基本資料包括性別，年齡，病程，血脂，血糖，糖化血紅蛋白水平進行分析。計算各位點等位基因及基因型頻率，并進行Hardy-Weinberg平衡檢測;應用x2檢驗，比較各組等

7、位基因頻率分布差異，采用dominant、recessive和additive模型比較各組基因型頻率分布差異。應用SHEsis和Haploview軟件對EPO基因3個位點分別進行連鎖不平衡(linkage disequilibrium，LD)和單倍體型分析。以p＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。
　　結果：
　　(1)EPOSNPrs1617640
　　等位基因結果:等位基因G的頻率在DR和DNR組間、PDR和DNR組間

8、、NPDR和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。
　　基因型結果:采用dominant、recessive和additive模型，基因型GG、GT、TT頻率分布在DR組和DNR組間、PDR組和DNR組間、NPDR組和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學差異(p＞0.05)。
　　(2)EPOSNPrs507392
　　等位基因結果:等位基因C的頻率分布在DR和DNR組間、PDR和DNR組間、NPDR和DNR組間比

9、較，差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。
　　基因型結果:采用recessive模型，與DNR組比較，基因型CC頻率在DR(OR=0.44,95％CI:0.22-0.86,p=0.012)和PDR組(OR=0.19,95％CI:0.06-0.66,p=0.003）均明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義;NPDR組和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。采用additive模型，與DNR組比較，基因型CC頻率在DR組（OR=0.45

10、,95％CI:0.23-0.89,p=0.027）和PDR組(OR=0.18,95％CI:0.05-0.63，p=0.002)均明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義;NPDR組和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。采用dominant模型計算，DR組和DNR組間、PDR組和DNR組間、NPDR組和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。
　　(3)EPOSNPrs551238
　　等位基因結果:與DNR組比較，

11、等位基因C頻率在PDR組中明顯降低（OR=0.72，95％CI:0.52-0.99，P=0.049）;DR和DNR組間、NPDR和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。
　　基因型結果:采用recessive模型，與DNR組比較，基因型CC頻率在DR組(OR=0.40,95％CI:0.20-0.79,p=0.010)和PDR組(OR=0.18,95％CI:0.05-0.61,p=0.002)均明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義

12、;NPDR組和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。采用additive模型，與DNR組比較，基因型CC頻率在DR組(OR=0.42,95％CI:0.21-0.83,p=0.016)和PDR組(OR=0.18,95％CI:0.05-0.62，p=0.002)均明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義;NPDR組和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。采用dominant模型，DR組和DNR組間、PDR組和DNR組間、NPDR組

13、和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。
　　(4)連鎖不平衡和單倍體型分析
　　連鎖不平衡分析顯示EPO基因SNP位點rs1617640，rs507392和rs551238存在顯著連鎖不平衡(D'＞0.90)。對三個位點的單倍體型分析，未發(fā)現(xiàn)單倍體與DR、PDR和NPDR發(fā)病易感性之間存在顯著的相關性。
　　(5)TCF7L2SNPrs11196205
　　等位基因結果:等位基因C的頻率分布在DR和

14、DNR組間、DR和DNR組間、NPDR和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。
　　基因型結果:采用dominant模型，基因型CC、CG、GG頻率分布在DR和DNR組間、PDR和DNR組間、NPDR和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學意義（p＞0.05）。
　　結論：
　　EPO基因SNP位點rs507392和rs551238與T2DM患者DR和PDR發(fā)病具有顯著相關性，攜帶基因型CC患者DR和PDR疾病易感性