替普瑞酮對(duì)大鼠慢性高眼壓視網(wǎng)膜HSP70表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　 青光眼是當(dāng)今世界范圍內(nèi)的主要致盲性眼病之一,由于眼壓超過視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞(rentinal ganglion cells,RGCs)的承受范圍,引起RGCs凋亡造成視功能的進(jìn)行性不可逆性損害,但RGCs凋亡的機(jī)制尚不清楚。HSP是生物體細(xì)胞在不良環(huán)境因素作用下所產(chǎn)生的一組特殊的蛋白質(zhì),能增強(qiáng)細(xì)胞存活能力,保護(hù)細(xì)胞不受或少受傷害。其中熱休克蛋白70(heat shock protein,HSP70)是在中樞神經(jīng)系統(tǒng)含量最

2、豐富的熱休克蛋白。早期研究證實(shí)抗?jié)兯幬锾嫫杖鹜?geranglgemnylacetone,GGA)可以明顯誘導(dǎo)胃腸粘膜、肝臟、心臟等組織的HSP70表達(dá)。新近研究發(fā)現(xiàn)一定劑量的替普瑞酮在中樞神經(jīng)系統(tǒng)也可以誘導(dǎo)HSP70表達(dá)。我們通過阻斷大鼠鞏膜淺層靜脈聯(lián)合絲裂霉素的方法阻斷房水的外引流途徑,使其眼壓升高,模擬慢性青光眼的發(fā)病過程。觀察替普瑞酮對(duì)大鼠慢性高眼壓視網(wǎng)膜HSP70表達(dá)的影響,為青光眼視神經(jīng)保護(hù)提供新的治療思路。
　　

3、 方法：
　　 1 慢性高眼壓模型的制備
　　 熱凝大鼠鞏膜淺層靜脈聯(lián)合應(yīng)用絲裂霉素阻斷房水外引流途徑制成模型；TONO-PEN XL型筆式眼壓計(jì)測量術(shù)前,術(shù)后即刻,1d,3d,7d,14d,21d,28d眼壓。
　　 2 HE染色觀察視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)變化。
　　 3 正常視網(wǎng)膜,慢性高眼壓視網(wǎng)膜,慢性高眼壓+GGA后視網(wǎng)膜HSP70蛋白表達(dá)水平的初步研究。
　　 應(yīng)用非生物素二步法免疫組化法檢測正常

4、視網(wǎng)膜,慢性高眼壓視網(wǎng)膜,用藥后視網(wǎng)膜中HSP70蛋白表達(dá)的部位和程度。統(tǒng)計(jì)結(jié)果均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組問比較應(yīng)用One-Way ANOVA分析,均用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果：
　　 1 電凝大鼠鞏膜淺層靜脈聯(lián)合應(yīng)用絲裂霉素阻斷房水外引流途徑制成模型成功。
　　 2 免疫組化法發(fā)現(xiàn)HSP70在正常視網(wǎng)膜細(xì)胞的胞漿和胞核無陽性或極弱陽性染色；在實(shí)驗(yàn)組表現(xiàn)在細(xì)胞胞核和/或胞漿的有不同程度的褐色或

5、黃棕色陽性染色。HSP70的免疫陽性染色主要位于視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層,內(nèi)核層也可見到微弱表達(dá)。
　　 3 高眼壓+GGA組與高眼壓組相比在術(shù)后1d時(shí)視網(wǎng)膜內(nèi)HSP70蛋白的表達(dá)略有增加但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=1.106,P=0.352),3d,7d時(shí)視網(wǎng)膜內(nèi)HSP70蛋白的表達(dá)明顯增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=70.030,P=0.001；F=180.649,P=0.000)；14d,21d組視網(wǎng)膜內(nèi)HSP70蛋白的表達(dá)有所下降但差