地塞米松對(duì)ANIT誘導(dǎo)的膽汁淤積大鼠肝膽系統(tǒng)AQP1表達(dá)的影響.pdf

1、目的:本研究擬通過(guò)α-萘異硫氰酸(ANIT)誘導(dǎo)膽汁淤積大鼠動(dòng)物模型,并予以糖皮質(zhì)激素(GC)干預(yù)這一臨床常用的治療方法,觀測(cè)試驗(yàn)大鼠肝臟結(jié)構(gòu)及功能的變化、膽汁分泌量的改變,采用免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)水通道蛋白1(AQP1)的表達(dá),尋求其表達(dá)規(guī)律,進(jìn)一步探討膽汁淤積的分子機(jī)制,研究GC對(duì)肝膽系細(xì)胞膽汁分泌機(jī)能的影響并探討其影響機(jī)制。
　　方法:將健康雄性Wistar成年大鼠32只隨機(jī)分為4組,每組8只。分為A組,僅灌花生油組。B組

2、,僅灌ANIT液組。C組,灌ANIT液的同時(shí)予地塞米松(DEM)處理。D組,灌ANIT液后24小時(shí)予DEM處理。10g/L ANIT花生油溶液一次性灌胃誘導(dǎo)肝損傷,劑量150mg/kg。DEM10mg/kg與2ml生理鹽水配伍腹腔內(nèi)注射。灌服48小時(shí)后各組試驗(yàn)大鼠膽總管插管收集膽汁并計(jì)1小時(shí)量,取門靜脈血送自動(dòng)生化儀檢測(cè)肝功能。肝臟標(biāo)本 HE染色光鏡觀察。免疫組織化學(xué)方法檢測(cè) AQP1的表達(dá)。每只大鼠取3張切片進(jìn)行圖象分析,求其平均光密

3、度值。
　　結(jié)果:1.膽紅素的變化:B組總膽紅素(TBIL),直接膽紅素(DBIL)明顯高于A組(P<0.01)。CD兩組膽紅素指標(biāo)低于B組(P<0.01),D組與C組兩組無(wú)明顯區(qū)別(P>0.05)。D組略高于C組。BCD三組都以直接膽紅素為主。
　　2.堿性磷酸酶(ALP)變化:B組明顯高于A組(P<0.01)。B組高于C組(P<0.05),D組高于BC組(P<0.01)。
　　3.丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)的變化:B組

4、明顯高于A組(P<0.01)。CD兩組,BD兩組沒(méi)有差別(P>0.05),B組低于C組(P<0.01)。
　　4.膽汁量(BC):A組要明顯多于B組(P<0.01)。BCD三組中,C組多于BD組(P<0.01)。D組多于B組(P<0.01)。
　　5.病理學(xué)改變:A組肝臟外觀輪廓、顏色正常。肝組織病理觀察,肝小葉結(jié)構(gòu)清晰,肝細(xì)胞索排列整齊有序,肝細(xì)胞核大而圓,核膜清晰,胞質(zhì)豐富。B組肝臟外觀明顯腫脹,顏色略顯灰白。肝組織病理

5、切片觀察,小葉間膽管增生,膽管上皮細(xì)胞腫脹、壞死及其脫落碎屑阻塞膽管腔,膽管增生,肝小葉輪廓不清,匯管區(qū)大量炎細(xì)胞浸潤(rùn),肝細(xì)胞濁腫、空泡,嗜酸性變,壞死明顯。BCD組又以B組重,D組C組病理改變依次有所減輕,但差別不大。
　　6.免疫組化切片光密度值(OD Value):A組胞膜可見(jiàn)棕黃色顆粒。B組表達(dá)明顯為少,少見(jiàn)于胞膜。CD兩組可見(jiàn)胞膜膽管側(cè)有表達(dá)。A組免疫組化光密度值要明顯高于B組(P<0.01)。BCD三組中,C組高于BD