地塞米松對ANIT誘導的膽汁淤積大鼠肝膽系統(tǒng)AQP1表達的影響.pdf

1、目的:本研究擬通過α-萘異硫氰酸(ANIT)誘導膽汁淤積大鼠動物模型,并予以糖皮質(zhì)激素(GC)干預這一臨床常用的治療方法,觀測試驗大鼠肝臟結構及功能的變化、膽汁分泌量的改變,采用免疫組織化學的方法檢測水通道蛋白1(AQP1)的表達,尋求其表達規(guī)律,進一步探討膽汁淤積的分子機制,研究GC對肝膽系細胞膽汁分泌機能的影響并探討其影響機制。
　　方法:將健康雄性Wistar成年大鼠32只隨機分為4組,每組8只。分為A組,僅灌花生油組。B組

2、,僅灌ANIT液組。C組,灌ANIT液的同時予地塞米松(DEM)處理。D組,灌ANIT液后24小時予DEM處理。10g/L ANIT花生油溶液一次性灌胃誘導肝損傷,劑量150mg/kg。DEM10mg/kg與2ml生理鹽水配伍腹腔內(nèi)注射。灌服48小時后各組試驗大鼠膽總管插管收集膽汁并計1小時量,取門靜脈血送自動生化儀檢測肝功能。肝臟標本 HE染色光鏡觀察。免疫組織化學方法檢測 AQP1的表達。每只大鼠取3張切片進行圖象分析,求其平均光密

3、度值。
　　結果:1.膽紅素的變化:B組總膽紅素(TBIL),直接膽紅素(DBIL)明顯高于A組(P<0.01)。CD兩組膽紅素指標低于B組(P<0.01),D組與C組兩組無明顯區(qū)別(P>0.05)。D組略高于C組。BCD三組都以直接膽紅素為主。
　　2.堿性磷酸酶(ALP)變化:B組明顯高于A組(P<0.01)。B組高于C組(P<0.05),D組高于BC組(P<0.01)。
　　3.丙氨酸轉氨酶(ALT)的變化:B組

4、明顯高于A組(P<0.01)。CD兩組,BD兩組沒有差別(P>0.05),B組低于C組(P<0.01)。
　　4.膽汁量(BC):A組要明顯多于B組(P<0.01)。BCD三組中,C組多于BD組(P<0.01)。D組多于B組(P<0.01)。
　　5.病理學改變:A組肝臟外觀輪廓、顏色正常。肝組織病理觀察,肝小葉結構清晰,肝細胞索排列整齊有序,肝細胞核大而圓,核膜清晰,胞質(zhì)豐富。B組肝臟外觀明顯腫脹,顏色略顯灰白。肝組織病理

5、切片觀察,小葉間膽管增生,膽管上皮細胞腫脹、壞死及其脫落碎屑阻塞膽管腔,膽管增生,肝小葉輪廓不清,匯管區(qū)大量炎細胞浸潤,肝細胞濁腫、空泡,嗜酸性變,壞死明顯。BCD組又以B組重,D組C組病理改變依次有所減輕,但差別不大。
　　6.免疫組化切片光密度值(OD Value):A組胞膜可見棕黃色顆粒。B組表達明顯為少,少見于胞膜。CD兩組可見胞膜膽管側有表達。A組免疫組化光密度值要明顯高于B組(P<0.01)。BCD三組中,C組高于BD