p75NTR與食管上皮細(xì)胞發(fā)育之間的關(guān)系.pdf

1、目的：證實(shí)在小鼠食管發(fā)育過(guò)程中存在p75NTR的表達(dá)，且表達(dá)p75NTR的陽(yáng)性細(xì)胞可能是小鼠食管上皮干細(xì)胞/祖細(xì)胞。
　　方法：1.在胎鼠發(fā)育過(guò)程中按照胎齡的先后，分階段獲取胎鼠食管。對(duì)獲得的食管進(jìn)行多聚甲醛常規(guī)固定，石蠟包埋，制作石蠟切片。對(duì)于胎齡過(guò)小的胚胎，采取整體包埋。對(duì)于生后的小鼠食管，分離取出后再進(jìn)行包埋。對(duì)切片進(jìn)行HE染色，尋找每個(gè)發(fā)育階段的食管上皮；2.免疫組化Envision法檢測(cè)p75NTR、CK4和CK14在小

2、鼠胚胎11到18天、生后1到7天、生后2周、生后4周以及成年這些發(fā)育階段在食管上皮的表達(dá)及變化情況；3.共聚焦免疫熒光方法檢測(cè)p75NTR分別與CK4、CK14進(jìn)行熒光雙標(biāo)，觀察二者之間的共表達(dá)及變化情況。
　　結(jié)果:1.從HE染色的結(jié)果中，我們最早可以尋找到胚胎第11天的小鼠食管上皮。2.p75NTR蛋白在胚胎食管上皮中有表達(dá)，主要定位于食管上皮基底層的細(xì)胞膜或細(xì)胞漿中；CK4主要定位于食管上皮基底層以上的細(xì)胞漿中；CK14主要