雙香油對異丙腎上腺素致大鼠急性心肌缺血及對血小板聚集性的實驗研究.pdf

1、雙香油對異丙腎上腺素致大鼠急性心肌缺血 及對血小板聚集性的實驗研究 近年來的研究證實，中醫(yī)藥防治心肌缺血的研究取得了可喜的進(jìn)展，研究范圍已由偏重于單味中藥及其有效成分的研究轉(zhuǎn)變?yōu)橹匾晱?fù)方制劑的研究，從整體來調(diào)節(jié)機(jī)體的失衡狀態(tài)。當(dāng)今，心血管疾病是威脅人類健康的大敵，尤其是冠心病的發(fā)病率呈逐年上升的趨勢，如何有效地防治冠心病是此項研究的重要目標(biāo)之一。蘇合香和降香兩種藥物提取出的雙香油對抗心肌缺血、抑制血小板聚集以及抑制血栓形成等

2、心血管疾病系統(tǒng)疾病方面有著重要的藥理作用。由雙香油制成的軟膠囊從長遠(yuǎn)意義來看對防治心血管系統(tǒng)疾病有著極其重要的臨床意義和較好的開發(fā)前景。本研究目的是在雙香油軟膠囊中兩種成分組成的最佳配比基礎(chǔ)上，通過整體動物實驗考查雙香油對異丙腎上腺素造成心肌缺血大鼠的抗心肌缺血的作用及對血小板聚集性的影響。 實驗材料與方法 (一)雙香油對異丙腎上腺素誘發(fā)大鼠急性心肌缺血的影響 1．將50只大鼠均衡分成5組，每組10只

3、，分別為模型對照組、雙香油給藥組設(shè)低、中、高3個劑量組及冠心蘇合丸陽性藥物對照組。模型對照組給植物油，受試藥物用植物油配成所需濃度，冠心蘇合丸陽性對照藥物用體積分?jǐn)?shù)為0.5％羧甲基纖維素鈉配成所需濃度。受試動物每天灌胃給藥1次，連續(xù)給藥7d，給藥容積為20 mL·kg<'-1>，于末次給藥后30 min用烏拉坦腹腔注射麻醉(1.2g·kg<'-1>)，成背位固定，用針型電極與心電圖機(jī)相連紀(jì)錄標(biāo)Ⅱ?qū)?lián)。皮下注射異丙腎上腺素，劑量為2mg·

4、Kg<'-1>。觀察給藥后5、10、20、30min心電圖中ST段偏移基線的高度，以各時間點總偏移值的均值為衡量心肌損傷的觀察指標(biāo)(靈敏度1mV=20mm)。 2.對5組受試動物分別于觀察后30min眶靜脈采血2mL，并測定血清AST、CK、CK-MB、LDH含量及PT、APTT、FIB。 3.對5組受試動物采血后，立即取出心臟并取心尖內(nèi)膜組織用質(zhì)量含量為2.5％戊二醛固定，在電鏡下觀察心肌超微結(jié)構(gòu)(主要是線粒體)，并從

5、大鼠心肌病理組織學(xué)上觀察雙香油對大鼠急性心肌缺血的影響。 (二)對二磷酸腺苷誘導(dǎo)的大鼠血小板聚集性的影響 將50只大鼠均衡分成5組，每組10只，分別為對照組、雙香油給藥組設(shè)低、中、高3個劑量組及冠心蘇合丸陽性藥物對照組。對照組給植物油，受試藥物用植物油配成所需濃度，冠心蘇合丸陽性對照藥物用體積分?jǐn)?shù)為0.5％羧甲基纖維素鈉配成所需濃度。受試動物每天灌胃給藥1次，連續(xù)給藥7d，給藥容積為20 mL·kg<'-1>，于末次給藥

6、后30min眶靜脈取血2mL，用質(zhì)量含量為3.8％的枸櫞酸鈉(體積比為1：9)抗凝，常規(guī)制備富血小板血漿(PRP)和貧血小板血漿(PPP)，加10μL 1.06 mol·L<'->二磷酸腺苷，在LG-KOALA血小板聚集測試儀上測定各組血小板聚集率，并求出聚集抑制率。聚集抑制率=(對照組聚集率-給藥組聚集率)/對照組聚集率×100％。 (三)統(tǒng)計學(xué)處理：結(jié)果以X±S表示，兩組間資料的比較采用t檢驗，應(yīng)用SPSS軟件處理。

7、 實驗結(jié)果 雙香油低、中、高劑量組大鼠灌胃給藥能明顯改善由異丙腎上腺素誘發(fā)的急性心肌缺血，表現(xiàn)為ST段偏移值減少，與模型對照組比較有顯著或非常顯著性差異(P<0.05，P<0.01)，并能明顯降低心肌缺血后心肌酶譜中AST、CK、CK-MB、LDH在血液中的含量，與模型對照組比較有顯著或非常顯著性差異(P<0.05，P<0.01)；雙香油低、中、高劑量組能延長血淤癥大鼠的凝血時間，與模型對照組比較明顯延長，并能降低血液中纖維蛋白

8、原的含量，具有非常顯著性差異(P<0.01)；雙香油低、中、高劑量組能抑制由二磷酸腺苷誘導(dǎo)的大鼠血小板聚集，具有非常顯著性差異(P<0.01)。雙香油軟膠囊是由傳統(tǒng)中藥降香用現(xiàn)代藥學(xué)方法CO<,2>超臨界萃取的方法得到其有效成份降香油，并與蘇合香油采用均勻設(shè)計方法篩選出最佳配比后進(jìn)行藥效學(xué)試驗而研制出的新藥。此藥主要用于防治冠狀動脈硬化引起的心肌供血不足。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，冠心病是因狹窄性冠狀動脈疾病而引起的心肌缺氧(供血不足)所造成

9、的缺血性心臟病。冠心病絕大多數(shù)由冠狀動脈粥樣硬化引起。當(dāng)冠狀動脈粥樣硬化時，這種粥樣硬化的斑塊，堆積在冠狀動脈，造成管腔嚴(yán)重狹窄，甚至閉塞，狹窄的血管處血小板數(shù)量增多，因內(nèi)皮脫落，血小板便粘附聚集，釋放TXA<,2>和五羥色胺，加上粥樣硬化處管壁合成PGl<,2>減少，則有強烈縮血管作用的，IXA<,2>增多而具有舒血管作用的PGI<,2>減少，二者失去平衡，引起冠狀動脈痙攣，從而導(dǎo)致了心肌血流量減少，供氧不足，使心臟的正常工作受到影響

10、，而產(chǎn)生一系列缺血性表現(xiàn)，如胸悶、氣短、心絞痛、心肌梗死，甚至猝死等。 此研究表明，異丙腎上腺素誘發(fā)大鼠心肌損傷的機(jī)理目前認(rèn)為大劑量異丙腎上腺素致心臟β受體過度興奮，心率加快，心肌收縮力增強，心肌耗氧量增加；當(dāng)興奮β<,2>受體時，擴(kuò)張外周血管，降低外周血管阻力，血壓降低，尤其舒張壓降低，減少冠狀動脈供血，結(jié)果導(dǎo)致心肌缺氧。心臟β受體的過度興奮，尚使心血管局部血管緊張素增加，進(jìn)而促進(jìn)心肌細(xì)胞內(nèi)Ca<'2+>超載。在異丙腎上腺素致

11、大鼠急性心肌缺血模型中，雙香油能顯著恢復(fù)大鼠心電圖的ST段偏移程度，對大鼠心肌缺血的改善以及抗血小板聚集等方面有著顯著的作用。蘇合香能提高血小板內(nèi)cAMP含量，降低血漿纖維蛋白原含量，提高纖溶酶活性。蘇合香脂有明顯抗血小板聚集作用，桂皮酸是其中主要成分，能明顯對抗由ADP和膠原誘導(dǎo)的血小板聚集。降香對前列腺素(PG)生物合成有強的抑制作用，抑制由ADP、花生烯四酸和膠原誘導(dǎo)的血小板凝集，因此也是瘀血的抑制劑成分。目前，對雙香油軟膠囊抗心